| 研究課題/領域番号 |
12771153
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| 研究種目 |
奨励研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
保存治療系歯学
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| 研究機関 | 日本歯科大学 |
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研究代表者 |
宮里 尚幸 日本歯科大学, 歯学部, 助手 (80307959)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2001年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2000年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | 水酸化カルシウム / 歯髄細胞 / アルカリホスファターゼ / オステオカルシン / オステオネクチン / オステオプロテゲリン / BMP / 培養細胞 / ヒト歯髄培養細胞 / アルカリフォスファターゼ活性 / RT-PCR法 |
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| 研究概要 |
水酸カルシウム(Ca(OH)_2)を培地(10%ウシ胎児血清含有D-MEM/F-12)に添加し、ヒト歯髄培養細胞のアルカリホスファターゼ(ALPase)活性、オステオカルシン(OSC)、及びオステオネクチンに及ぼす影響を調べた。さらにALPase、OSC、オステオプロテゲリン(OPG)、BMP2、BMP4、およびBMP7の遺伝子の発現について検討を行った。
1)蛋白量は培養21日目までは増加し、それ以降は減少した。Ca(OH)_2濃度0.01%の添加は、すべての培養日数において、無添加の場合より低い値を示した。ALPase活性は培養14日目で最も高い値を示し、Ca(OH)_2はALPase活性を増加させた。
2)OSC量は培養28日目で増加し、オステオネクチン量は減少し、Ca(OH)_2による抑制が認められた。
3)ALPase遺伝子の発現は、各濃度で認められ、OSCではCa(OH)_2濃度0.03%で強い発現が認められた。
4)BMP2遺伝子は、Ca(OH)_2濃度0.003%で経日的に増加傾向を示したのに対して、0.03%では抑制傾向が認められた。BMP4遺伝子は、0.03%で抑制傾向を示した。また、BMP7遺伝子の発現は、Ca(OH)_2濃度0.03%で認められた。
5)OPG遺伝子の発現は、0.03%で抑制傾向を示した。
ヒト歯髄培養細胞にCa(OH)_2を作用させることにより、ALPase活性、OSC量が上昇すること、また遺伝子発現の傾向とほぼ一致していることが明らかとなった。さらにCa(OH)_2の濃度変化により、骨誘導因子であるBMP2、BMP4および破骨細胞生成阻害因子であるOPGの遺伝子発現と、BMP7および硬組織形成抑制遣伝子であるOSCで異なった発現傾向を示すことが示唆された。
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