| 研究課題/領域番号 |
12771218
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| 研究種目 |
奨励研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
外科系歯学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
高橋 克 京都大学, 医学研究科, 助手 (90314202)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
2001年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2000年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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| キーワード | 歯牙再生 / 分子生物学 / 頭部神経提細胞 / 器官培養 / 第一鰓弓 / ノックアウトマウス / 組み換えウィルス / 頭部神経堤細胞 |
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| 研究概要 |
1、in vtroで頭部神経堤細胞より歯牙形成をおこす実験系の確立
E8-9stageマウス胎児を用いた第一鰓弓器官培養系において、使用するFBSのbatch selectionや濃度の検討、更に第一鰓弓部のmicrodissectionの方法など種々の培養条件を検討することにより、マウス頭部神経堤細胞が歯間棄細胞へ分化する実験系を確立した。
2、組み換えウイルスなどを利用して効率的に頭部神経堤細胞に遺伝子導入ができるシステムの確立
GFPなどのMolecular Markerを発現するアデノ、レトロ等、各種ウイルスベクターを利用し、上述した実験系において効率的に頭部神経堤細胞に遺伝子導入できるシステムを確立した。
3、多様な分化能をもつ頭部神経堤細胞から歯間葉細胞へ分化するために重要な遺伝子の解析
数多くのノックアウトマウスにおいて、歯牙形成などの器官形成前のstaqe(E8-9staqe)でのembryonic lethalityのため、その遺伝子の頭部神経堤細胞から歯面葉細胞への分化の関わりが検討できないでいた。上記1の実験系を歯牙形成前のそのembryonic lethalotyをrescueできることを確認した。その一方、上記2の実験stage(E8-9stage)でembryonic lethalityを示すノックアウトマウスの胎児に応用し、そのembryonic lethalityをrescueでぎるごとを確認した。その一方、上記2の実験系において、wild type及びmutantのRunx2などの遺伝子を強制発現させ、分化が促進されるかを検討している。
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