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胚性幹細胞に体細胞の核を移植する試み-臓器移植をめざした基礎的研究-

研究課題

研究課題/領域番号 12877040
研究種目

萌芽的研究

配分区分補助金
研究分野 実験病理学
研究機関川崎医科大学

研究代表者

刀袮 重信 (刀祢 重信)  川崎医科大学, 医学部, 助教授 (70211399)

研究分担者 湊川 洋介  川崎医科大学, 医学部, 教授 (50094678)
伏谷 建造  川崎医科大学, 医学部, 助教授 (00208993)
研究期間 (年度) 2000 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2001年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2000年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワードES細胞 / 核移植 / 臓器移植 / FS細胞 / 再生 / 細胞工学 / 細胞融合 / メチル化 / 幹細胞
研究概要

平成13年度は、まず1)未分化状態を維持した大量のES細胞から核を一斉に除去する条件を検討した。種々の試行錯誤の末に、サイトカラシンB存在下で遠心し、効率良く脱核する条件を確立した。更にこの脱核したES細胞は、核がない状態でも、短時間以内ならばシャーレに接着する能力を保持していることを確認した(投稿準備中)。このことは脱核したES細胞に患者の体細胞の核を導入し、その後シャーレに接着させ、未分化状態に戻し増殖させたあと、必要な細胞を分化誘導することが技術的に可能であることを示している。
2)またES細胞と体細胞の融合条件を決定するために、Neomycin耐性遺伝子を導入したトランスジェニッマウス由来の腎臓細胞(初代培養のため、無限増殖能はない)とES細胞(Neomycinで死滅)を電気融合法で融合させた。現在、種々の電気融合の条件を検討した後、Neomycin含有培養液でのコロニー形成能を解析中である。
以上当初設定した目標には到達できなかったが、今回助成いただいた研究によって、1)と2)の技術を併せることで、近い将来、受精卵を経由せずに、患者と遺伝的に同一なES細胞を容易に作製できる道を開いたと考えている。

報告書

(2件)
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (7件)

  • [文献書誌] Samejima, Tone, Earnshaw: "CAD/DFF40 nuclease is dispensable for high molecular weight DNA cleavage"Journal of Biological Chemistry. 276(48). 45427-45432 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Machida, Tsukiyama-Kohara et al.: "Inhibition of cytochrome C release in Fas-mechiated signaling pathway"Journal of Biological Chemistry. 276(15). 12140-12146 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Kusakabe, Sugimoto et al.: "Linearization and integration of DNA into cells proferentially occurs at intrinsically curved regions from human LINE-lolensit"Gene. 274(1-2). 271-281 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Tone, Kubo, Chyama et al.: "Quantitation of mRNA wing in vitro RNA amplification and northen hybridiprtion"Analytical Biochemistry. 284(2). 420-422 (2000)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Tone,S: "Quantitaion of mRNA using in vitro RNA amplification & Northern hybridization"Analytical Biochemistry. 284. 420-422 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Suzuki,S: "Expression of indoleamine 2,3-dioxygenase & tryptophan 2,3-dioxygenase in early concept;"Biochemical Journal. 355(in press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Machida,K: "Inhibition of Cytochrome C release in Fas-mediated signaling pathway by Hepatitis C viral proteins in transgenic mice liver"Journal of Biological Chemistry. (in press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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