NK細胞白血病/リンパ腫の増殖機序と増殖抑制に関する研究

• 研究課題/領域番号: 12877159
• 研究種目: 萌芽的研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 九州大学 (2001); 岡山大学 (2000)
• 研究代表者: 原田 実根 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (00019621)
• 研究分担者: 下田 和哉 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (90311844) ; 権藤 久司 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (10253428) ; 木浦 勝行 岡山大学, 医学部・附属病院, 講師 (10243502) ; 池田 和真 岡山大学, 医学部・附属病院, 講師 (50176088) ; 高田 穣 川崎医科大学, 医学部, 教授 (30281728) ; 品川 克至 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (00273988) ; 石丸 文彦 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (50284097)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2001
• 研究課題ステータス: 完了 (2001年度)
• 配分額: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円); 2001年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2000年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
• キーワード: NK細胞リンパ腫 / 鼻腔原発 / エプスタイン・バーウィルス(EBV) / latent membrane protein1 / アポトーシス / 薬剤耐性 / P糖蛋白 / NKリンパ種 / Epstein-Barr virus(EBV) / NK細胞 / LMP-1 / Bcl-2

研究概要

NK細胞白血病/リンパ腫の増殖機序と増殖抑制を検討するため、まず鼻腔原発NK細胞リンパ腫の白血病化症例から細胞株(NK-YS)を樹立した。本細胞株は形態的には大顆粒状リンパ球で表現型はCD2^+、CD3^-、CD5^+、CD7^+、CD16^-、CD56^+、CD57^-であり、EBウイルス(EBV)の感染は2型潜伏感染を示し、NK細胞白血病/リンパ腫に特徴的な形質を保持していた。
EBVでコードされたlatent membrane protein1(LMP-1)はEBV感染B細胞の不死化に必須であり、アポトーシスによる細胞死を妨げるアポトーシス抑制分子であるBcl-2の発現を誘導する。そこでLMP-1に対するアンチセンス・オリゴデオキシ核酸(AS-Oligo)の影響を2つのNK細胞リンパ腫細胞株(NK-YSとYT)細胞で検討したところ、AS-OligoはNK-YSおよびYTにおけるLMP-1mRNAや蛋白の発現をEBVで変換したB細胞株(CMG-1)と同様に抑制した。一方、細胞増殖、アポトーシス誘導、Bcl-2発現はCMG-1では抑制されたが、NK-YSおよびYTではこのような抑制は観察されなかった。これらの成績は、EBV陽性NK細胞リンパ腫では増殖、アポトーシスやBcl-2発現の抑制がEBV変換B細胞株とは異なり、LMP-1による直接的な制御を受けておらず、他のシグナル伝達システムを介することが示唆される。
次にNK-YSを用いてアポトーシス誘導およびP糖蛋白(Pg-P)の発現を検討した。NK-YSはアポトーシス誘導薬剤であるetoposide(ETP)やdoxorubicin(DNR)に抵抗性を示し、Bcl-2およびP-gPを発現したが、p53は見られなかった。そこで、P-qp拮抗剤であるcyclosporinA(CsA)を培養系に添加すると、CsA+ETPやCsA+DNRはアポトーシスによる細胞死を誘導した。これらの成績はP-gpを介する薬剤耐性がNK-YSの薬剤耐性の基本的な機序であり、抗癌剤とCsAの併用は鼻腔原発NK細胞リンパ腫白血病の治療に有用であることを示唆する。

研究成果

• [文献書誌] Nakase K, Harada M. et al.: "Dominant negative isoform of the Ikaros gene in patients with adult B-cell acute lymphoblastic leukemia"Cancer Res.. 60. 4062-4065 (2000)
• [文献書誌] Noguchi T, Harada M, et al.: "Antisense oligodeoxymucleotides to latent membrane protein 1 induce growth inhibition, apoptosis and Bcl-2 suppression in Epstein-Barr virus(EBV)-positive natural killer cell lymphoma cells"Br J Hematol. 114. 84-92 (2001)
• [文献書誌] Sunami K, Harada M, et al.: "Administration of granulocyte colony-stimulating factor induces hyporesponsiveness to lipopoly saccharide and impairs antigen-presenting function of peripheral blood monocytes"Exp Hematol. 29. 1117-1124 (2001)
• [文献書誌] Uno M, Harada M, et al.: "In vitro induction of apoptosis for nasal angiocentric NK cell lymphomaderived cell line, NK-YS by etonoside and cyclosporine A"Br J Haematol. 113. 1009-1014 (2001)
• [文献書誌] Fujii N, Harada M, et al.: "Expression of minor histompatibility antigen, HA-1, in solid tumor cells"Transplantation. (In press).
• [文献書誌] Himeji D, Harada M, et al.: "Characterization of caspase-8L : A novel isoform of caspase-8 that behaves as an inhibitor of the caspase cascade"Blood. (In press).
• [文献書誌] 原田実根, 薗田精昭, 高上洋一: "末梢血幹細胞移植の実際"南江堂. 232 (2001)
• [文献書誌] Nawa Y,Harada M, et al: "G-CSF reduces IFN-ν and IL-4 production by T cells after allogeneic stimulation by indirectly modulating monocyte function."Bone Marrow Transplant. 25. 1041-1046 (2000)
• [文献書誌] Nakase K,Harada M, et al: "Dominant negative isoform of the Ikaros gene in patients with adult B-cell acute lymphoblastic leukemia."Cancer Res. 60. 4062-4065 (2000)
• [文献書誌] Fujii N,Harada M, et al: "Allogeneic peripheral blood stem cell transplantation for the treatment of chronic active Epstein-Barr virus infection."Bone Marrow Transplant. 26. 805-808 (2000)
• [文献書誌] Matuo K,Harada M, et al: "Hospital capacity and post-transplant survival after allogeneic bone marrow transplantation : analysis of data from the Japan Society for Hematopoietic Cell Transplantation."Bone Marrow Transplant. 26. 1061-1067 (2000)
• [文献書誌] Noguchi T,Harada M, et al: "Antisense oligodeoxynucleotides to LMP-1 induces growth inhibition, apoptosis and Bcl-2 suppression in Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B-lymphoblastoid cells, but not in EBV-positive NK cell lymphoma cells."Br J Haematol. (In press).