| 研究課題/領域番号 |
12J01544
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 研究分野 |
遺伝・ゲノム動態
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
山本 直樹 京都大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2014年度)
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| 配分額 *注記 |
3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
2014年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2013年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2012年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | long noncoding RNA / cAMP / neuronal differentiation / bidirectional promoter / histone acetylation / 細胞分化 / 非コードRNA / エピジェネティクス |
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| 研究実績の概要 |
本課題は、ラットPC12細胞の不可逆的な神経分化に関わるローカルなエピジェネティック制御因子 promoter-associated noncoding RNA（pancRNA）の同定と作用機序の解明を目的としている。本年度は前年度に行ったPC12のダイレクショナルRNA-seq解析結果を元に、PC12の不可逆分化に関わる領域特異的エピゲノム制御因子である機能的非コードRNAであるpancNusap1を同定し、研究目標を達成した。
RNA-seqデータの解析より、不可逆的に分化に関わるpancRNAとそのmRNAのペアとして、M期進行にかかわる遺伝子Nusap1とそのプロモーターから発現しているpancRNA、pancNusap1のペアに着目した。
Nusap1とpancNusap1の発現状態はプロモーターのヒストンのアセチル化変化を伴って正に相関しており、細胞の増殖が活発なほど発現が高く、不可逆分化後は強く発現抑制されていた。レンチウィルスを用いたpancNusap1の人為的な発現抑制は、Nusap1遺伝子の発現抑制とNusap1プロモーター領域のヒストンアセチル化レベルの低下、細胞周期の停止を引き起こした。逆に、不可逆分化PC12におけるpancNusap1の人為的な過剰発現は、転写方向特異的に、Nusap1の発現上昇、Nusap1プロモーターのヒストンアセチル化レベルの上昇、さらには可逆的な分化状態への転換を促した。
これらの事実から、PC12細胞の不可逆的分化過程では、cAMP依存的にpancNusap1の発現が抑制され、その結果Nusap1プロモーター領域のヒストンアセチル化レベルの低下を引き起こし、Nusap1の発現と細胞増殖がエピジェネティックに抑制された結果、不可逆的な分化を引き起こしているということが考えられる。
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| 現在までの達成度 (段落) |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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