ヒト腸管切除検体を用いた炎症性腸疾患の免疫学的発症機序の解明と新規治療法の開発

• 研究課題/領域番号: 12J05920
• 研究種目: 特別研究員奨励費
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 国内
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 三上 洋平 慶應義塾大学, 医学部, 特別研究員(PD)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 3,630千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2013年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円); 2012年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
• キーワード: 炎症性疾患 / サイトカイン / マクロファージ / 自然リンパ球 / 遺伝子発現 / 炎症性腸疾患 / Innate lympohoid cell / Lymphoid tissue inducer cells / Th17細胞 / Th1細胞 / Gut-associated lymphoid tissue

研究実績の概要

前年度までにマウスを用いて行った基盤的研究から、炎症状態、定常状態ともヘルパーT細胞(Th1, Th17細胞)および、Innate lymphoid cell (ILC)は独立した制御機構が存在することが示唆された。IBD患者腸管切除検体において、ILCの細胞数の増減は認められない物の、粘膜修復能に関与するIL-22産生能を炎症部と非炎症部において比較したところ、ILCのIL-22産生能は炎症部と比して非炎症部において有意に高値を示した。また、IL-22産生性のILCはCD127(+)CD56(-)分画(CD127SP)およびCD127(+)CD56(+)分画(DP)において認められた。次にCD127SPおよびDP分画を単離し定量PCRを実施したところ、Flowcytometryの結果と一致してCD127SPおよびDP分画はRORγt陽性であり、これらはそれぞれマウスにおけるNCR- ILC3, NCR+ILC3に一致する分画と考えられる。これらILC3分画からのIL-22産生機構を検討するために、マウスの腸管を用いて、ILC3分画における網羅的遺伝子発現解析(RNA-seq)および、クロマチン構造(ATAC-seq)を検討した。まず初めに、ILC3の各分画を効率よく分離するための細胞調整方法および分離方法を検討した。CCR6+NCR-ILC3はLTiに、CCR6-NCR-ILC3はT-betを発現しNCR+ILC3に近い性質を持っていることを確認しNCR+ILC3とLTiの遺伝子発現をRNA-seqを用いて比較検討した。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Risk and Management of Intra-Abdominal Abscess in Crohn's Disease Treated with Infliximab (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoneno K, Hisamatsu T, Matsuoka K, Okamoto S, Takayama T, Ichikawa R, Sujino T, Miyoshi J, Takabayashi K, Mikami Y, Mizuno S, Wada Y, Yajima T, Naganuma M, Inoue N, Iwao Y, Ogata H, Hasegawa H, Kitagawa Y, Hibi T, Kanai T
  • 雑誌名: Digestion 巻: 89 号: 3 ページ: 201-208
  • DOI: 10.1159/000360618
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cross-talk between RORγt+ innate lymphoid cells and intestinal macrophages induces mucosal IL-22 production in Crohn's disease (2014)
  • 著者名/発表者名: Mizuno S, Mikami Y, Kamada N, Handa T, Hayashi A, Sato T, Matsuoka K, Matano M, Ohta Y, Sugita A, Koganei K, Sahara R, Takazoe M, Hisamatsu T, Kanai T
  • 雑誌名: Inflamm Bowel Dis. 巻: 20 ページ: 1426-1434
  • DOI: 10.1007/82_2014_371
  • ISBN: 9783319073941, 9783319073958
  • 査読あり
• [雑誌論文] Classical Th1 cells obtain colitogenicity by co-existence of RORγt-expressing T cells in experimental colitis (2014)
  • 著者名/発表者名: Saigusa K, Hisamatsu T, Handa T, Sujino T, Mikami Y, Hayashi A, Mizuno S, Takeshita K, Sato T, Matsuoka K, Kanai T
  • 雑誌名: Inflamm Bowel Dis 巻: 20 号: 10 ページ: 1820-1827
  • DOI: 10.1097/mib.0000000000000149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Macrophages and dendritic cells emerge in the liver during intestinal inflammation and predjspose the liver to inflammation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mikami Y, Mizuno S, Nakamoto N, Hayashi A, Sujino T, Sato T, Kamada N, Matsuoka K, Hisamatsu T, Ebinuma H, Hibi T, Yoshimura A, Kanai T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 号: 1 ページ: 1-1
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0084619
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dendritic cells administered intrarectally penetrate the intestinal barrier to break intestinal tolerance via Th2-medeiated colitis in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Handa T, Kanai T, Sato T, Mikami Y, Sujino T, Hayashi. A, Mizuno S, Matsumoto A, Hisamatsu T, Hibi T.
  • 雑誌名: Immunology Letters 巻: 150 号: 1-2 ページ: 123-9
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2013.01.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCR2 knockout exacerbates cerulein-induced chronic pancreatitis with hyperglycemia via decreased GLP-1 receptor expression and insulin secretion. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Kanai T, Saeki K, Takabe M, Irie J, Miyoshi J, Mikami Y, Teratani T, Suzuki T, Miyata N, Hisamatsu T, Nakamoto N, Yamagishi Y, Higuchi H, Ebinuma H, Hozawa S, Saito H, Itoh H, Hibi T.
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 巻: 304 号: 8 ページ: G700-G707
  • DOI: 10.1152/ajpgi.00318.2012
  • 査読あり
• [雑誌論文] C-C motif chemokine receptor 9 positive macrophages activate hepatic stellate cells and promote liver fibrosis in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Chu PS, Nakamoto N, Ebinuma H, Usui S, Saeki K, Matsumoto A, Mikami Y, Sugiyama K, Tomita K, Kanai T, Saito H, Hibi T.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 58 号: 1 ページ: 337-350
  • DOI: 10.1002/hep.26351
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-22-Producing RORyt-Dependent Innate Lymphoid Cells Play a Novel Protective Role in Murine Acute Hepatitis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto A, Kanai T, Mikami Y, Chu PS, Nakamoto N, Ebinuma H, Saito H, Sato T, Yagita H, Hibi T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 号: 4 ページ: e62853-e62853
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0062853
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Single Strain of Clostridium butyricum Induces Intestinal I L-10-Producing Macrophages to Suppress Acute Exlperimental Colitis in Mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hayashi A, Sato T, Kamada N, Mikami Y, Matsuoka K, Hisamatsu T, Hlbi T, Roers A, Yagita H, Ohteki T, Yoshimura A, Kanai T.
  • 雑誌名: Cell Host Microbe 巻: 13 号: 6 ページ: 711-22
  • DOI: 10.1016/j.chom.2013.05.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] ROR_Yt-dependent IL-17A-producing cells in the pathogenesis of intestinal inflammation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanai T, Mikami Y, Sujino T, Hisamatsu T, Hibi T.
  • 雑誌名: Mucosal Immunology 巻: 5 号: 3 ページ: 240-247
  • DOI: 10.1038/mi.2012.6
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCR9(+) plasmacytoid dendritic cells in the small intestine suppress development of intestinal inflammation in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Mizuno S, Kanai T, Mikami Y, Sujino T, Ono Y, Hayashi A, Handa T, Matsumoto A, Nakamoto N, Matsuoka K, Hisamatsu T, Takaishi H, Hibi T.
  • 雑誌名: Immunology letters 巻: 146 号: 1-2 ページ: 64-69
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2012.05.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term prognosis of patients with ulcerative colitis treated with cytapheresis therapy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takayama T, Kanai T, Matsuoka K, Okamoto S, Sujino T, Mikami Y, Hisamatsu T, Yajima T, Iwao Y, Ogata H, Hibi T.
  • 雑誌名: Journal of Crohns and Colitis 巻: 7 号: 2 ページ: e49-e54
  • DOI: 10.1016/j.crohns.2012.05.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCR9(+) macrophages are required for eradication of peritoneal bacterial infections and prevention of polymicrobial sepsis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Mizukami T, Kanai T, Mikami Y, Hayashi A, Doi T, Handa T, Matsumoto A, Jun L, Matsuoka K, Sato T, Hisamatsu T, Hibi T.
  • 雑誌名: Immunology Letters 巻: 147 号: 1-2 ページ: 75-79
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2012.06.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] T-helper 17 and Interleukin-17-Producing Lymphoid Tissue Inducer-Like T Cells Make Different Contributions to Colitis in Mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ono Y, Kanai T, Sujino T, Nemoto Y, Kanai Y, Mikami Y, Hayashi A, Matsumoto A, Takaishi H, Ogata H, Matsuoka K, Hisamatsu T, Watanabe M, Hibi T.
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 143 号: 5 ページ: 1288-1297
  • DOI: 10.1053/j.gastro.2012.07.108
  • 査読あり
• [雑誌論文] IgA plasma cells express the negative regulatory co-stimulatory molecule programmed cell death 1 ligand and have a potential tolerogenic role in the intestine. (2012)
  • 著者名/発表者名: Doi T, Kanai T, Mikami Y, Sujino T, Jun L, Ono Y, Hayashi A, Hibi T.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 425 号: 4 ページ: 918-923
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.08.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dysregulated balance of retinoid-related orphan receptor _Yt-dependent innate lymphoid cells is involved in the pathogenesis of chronic DSS-induced colitis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kimura K, Kanai T, Hayashi A, Mikami Y, Sujino T, Mizuno S, Handa T, Matsuoka K, Hisamatsu T, Sato T, Hibi T.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 427 号: 4 ページ: 694-700
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.09.091
  • 査読あり
• [雑誌論文] MyD88-dependent interleukin-10 production from regulatory CD11b(+)Gr-1(high) cells suppresses development of acute cerulein pancreatitis in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Koike Y, Kanai T, Saeki K, Nakamura Y, Nakano M, Mikami Y, Yamagishi Y, Nakamoto N, Ebinuma H, Hibi T.
  • 雑誌名: Immunology Letters 巻: 148 号: 2 ページ: 172-177
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2012.08.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immune aspects of the pathogenesis of inflammatory bowel disease. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hisamatsu T, Kanai T, Mikami Y, Yoneno K, Matsuoka K, Hibi T.
  • 雑誌名: Pharmacology & Therapeutics 巻: 137 号: 3 ページ: 283-297
  • DOI: 10.1016/j.pharmthera.2012.10.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anticoagulation therapy dramatically improved severe sigmoiditis with findings resembling inflammatory bowel disease, which was caused by mesenteric venous thrombosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Mikami Y, Kanai T, Iwasaki E, Naganuma M, Yamagishi Y, Shimoda M, Matsuoka K, Hisamatsu T, Iwao Y, Ogata H, Nakatsuka S, Mukai M and Hibi T.
  • 雑誌名: Clinical Journal of Gastroenterology 巻: 5 ページ: 377-382
  • 査読あり
• [学会発表] Distinct roles of miR221/222 in balancing T helper cell homeostasis and function. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mikami, Hayato Takahashi, Yuka Kanno, Amanda Poholek, Kan Jiang and John J. O’Shea
  • 学会等名: NIAMS IRP Retreat
  • 発表場所: Washington D.C. USA
  • 年月日: 2014-05-29 – 2014-05-30
• [学会発表] Intestinal Inflammation Instructs Increasing Liver Macrophages and Dendritic Cells to Dispose Liver to the Inflammation (2013)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mikami
  • 学会等名: JSICR-MMCB2013 Joint Symposium in Tokyo
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-05-21
• [学会発表] Germ free systemを用いた腸内フローラに起因する肝免疫異常の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 三上洋平
  • 学会等名: 第9回日本消化管学会総会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-01-25
• [学会発表] Colitogenic ROR gamma t dependent Th1 cells may help the generation of colitogenic ROR gamma t independent Th1 cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mikami
  • 学会等名: Asian IBD Symposium -Seoul 2012
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2012-11-03
• [学会発表] Yohei Mikami (2012)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mikami
  • 学会等名: Intestinal Inflammation Instructs Increasing Liver Macrophages and Dendritic Cells to Trigger Inflammation in the Liver
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2012-11-02
• [学会発表] New Immunosuppressive System by Myeloid-Derived Suppressor Cells in the Lamina Propria of Ulcerative Colitis Patients (2012)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mikami
  • 学会等名: Digestive disease week 2012
  • 発表場所: San Diego (USA)
  • 年月日: 2012-05-21