上皮系細胞におけるヒトパピローマウイルス制御遺伝子の機能解析

• 研究課題/領域番号: 13214048
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 酒井 博幸 京都大学, ウイルス研究所, 助教授 (80281731)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 34,300千円 (直接経費: 34,300千円); 2004年度: 7,900千円 (直接経費: 7,900千円); 2003年度: 8,700千円 (直接経費: 8,700千円); 2002年度: 9,000千円 (直接経費: 9,000千円); 2001年度: 8,700千円 (直接経費: 8,700千円)
• キーワード: HPV / がんウイルス / ウイルス複製 / ウイルス発がん / 過形成 / パピローマウイルス / がん遺伝子 / 上皮組織 / 細胞分化 / 癌抑制遺伝子 / テロメレース / 細胞周期

研究概要

ヒトパピローマウイルス(HPV)の感染は多くの上皮性腫瘍の形成に関与しており、特に子宮頸がんに関しては主要なリスクファクターであると考えられている。がんウイルスであるHPVの感染、および複製機構を分子レベルで明らかにすることはがんの予防治療に貢献すると考えられるが、このウイルスの生活環は上皮細胞の分化機構と密接に関連しており、一般的な細胞培養条件下では解析が困難である。そこで上皮の組織形態をin vitroで再現できる皮膚モデル培養系(raft culture)を利用してウイルスの複製機構や各遺伝子の生物活性を解明することを目指した。この皮膚モデル培養系はHPVの生活環を支持できることが報告されており、このアッセイ系を用いて従来は樹立した齧歯類細胞でのトランスフォーメーションアッセイが中心であったHPVの制御遺伝子の機能に関しても、より生理的な条件でウイルス発癌との関連を明らかにできると考えた。
得られた結果をまとめると、(1)効率の良いHPV複製系を確立し、抗ウイルス剤のスクリーニングなどに適用出来る事が確認された、(2)HPV感染細胞が悪性形質を獲得する過程でras経路の変異が関与することを皮膚モデル培養系で明確に示すことが出来た、(3)ハイリスク型のE7によって上皮の過形成が誘導されることを示し、その機構にpRb, p130の不活化、およびJNKの活性化が寄与する可能性を示した、(4)HPV陽性の子宮頸がん細胞でE7の発現維持が細胞増殖機能に必須であることを示した、(5)E4遺伝子産物が細胞のDNA合成と細胞周期進行をuncouplingし、G2/M期で細胞増殖を停止する機能があることを見いだした。

研究成果

• [雑誌論文] Downregulation of CD4 is required for maintenance of viral infectivity of HIV-1. (2003)
  • 著者名/発表者名: 田中 正和 他
  • 雑誌名: Virology 311 ページ: 316-325
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Downregulation of CD4 is required for maintenance of viral infectivity of HIV-1. (2003)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, M., Ueno, T.Nakahara, T., Sasaki, K., Ishimoto, A., Sakai, H.
  • 雑誌名: Virology 311 ページ: 316-325
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Modulation of the cell division cycle by HPV18 E4. (2002)
  • 著者名/発表者名: 中原 知美 他
  • 雑誌名: Journal of Virology 76 ページ: 10914-10920
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Modulation of the cell division cycle by HPV18 E4. (2002)
  • 著者名/発表者名: Nakahara, T.Nishimura, A., Tanaka, M., Ueno, T., Ishimoto, A., Sakai, H.
  • 雑誌名: J.Virol. 76 ページ: 10914-10920
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Analysis of dominant-negative effects of mutant Env proteins of human immunodeficiency virus type 1. (2001)
  • 著者名/発表者名: 岩谷 靖雅 他
  • 雑誌名: Virology 286 ページ: 45-53
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Analysis of dominant-negative effects of mutant Env proteins of human immunodeficiency virus type 1. (2001)
  • 著者名/発表者名: Iwatani, Y., Kawano, K., Ueno, T., Tanaka, M., Ishimoto, A., Ito, M., Sakai, H.
  • 雑誌名: Virology 286 ページ: 453-53
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Modification of virus infectivity by cytoplasmic tail of HIV-1 TM protein. (2001)
  • 著者名/発表者名: Iwatani, Y., Ueno, T., Nishimura, A., Zhang, X., Hattori, T., Ishimoto, A., Ito, M., Sakai, H.
  • 雑誌名: Virus Res. 74 ページ: 75-87
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Mechanisms of human papillomavirus E2 mediated repression of viral oncogene expression and cervical cancer cell growth inhibition. (2000)
  • 著者名/発表者名: 西村 聡子 他
  • 雑誌名: Journal of Virology 74 ページ: 3752-3760
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Resistance to friend murine leukemia virus infection conferred by the Fv-4 gene is recessive but appears dominant from the effect of the immune system. (2000)
  • 著者名/発表者名: 張 鳳民 他
  • 雑誌名: Journal of Virology 74 ページ: 6193-6197
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Functional association between the nef gene product and gag-pol region of HIV-1. (2000)
  • 著者名/発表者名: 小野 岳史 他
  • 雑誌名: FEBS Letters 466 ページ: 233-238
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Mechanisms of human papillomavirus E2 mediated repression of viral oncogene expression and cervical cancer cell growth inhibition. (2000)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, A., Ono, T., Ishimoto, A., Dowhanick, J.J., Frizzell, M.A., Howley, P.M., Sakai, H.
  • 雑誌名: J.Virol. 74 ページ: 3752-3760
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Resistance to friend murine leukemia virus infection conferred by the Fv-4 gene is recessive but appears dominant from the effect of the immune system. (2000)
  • 著者名/発表者名: Zhang, F., Ya, L.T., Iwatani, Y., Higo, K., Suzuki, Y., Tanaka, M., Nakahara, T., Ono, T., Sakai, H., Kuribayashi, K., Ishimoto, A.
  • 雑誌名: J.Virol. 74 ページ: 6193-6197
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Functional association between the nef gene product and gag-pol region of HIV-1. (2000)
  • 著者名/発表者名: Ono, T., Iwatani, Y., Nishimura, A., Ishimoto, A, Sakai, H.
  • 雑誌名: FEBS Letters 466 ページ: 233-238
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] 田中 正和: "Downregulation of CD4 is required for maintenance of viral infectivity of HIV"Virology. 311・2. 316-325 (2003)
• [文献書誌] 中原 知美: "Modulation of the cell division cycle by HPV 18 E4"Journal of Virology. 76巻11号. 10914 (2002)
• [文献書誌] 田中 正和: "Downregulation of CD4 is required for maintenance of viral infectivity of HIV-1"Virology. (発表予定). (2003)
• [文献書誌] 岩谷靖雅, 他: "Modification of virus infectivity by cytoplasmic tail of HIV-1 TM protein"Virus Research. 74. 75-87 (2001)
• [文献書誌] 岩谷靖雅 他: "Function of hetero-oligomeric Env proteins containing mutant Env protein of human immunodeficiency virus type 1 in viral infectivity"Virology. 286. 45-53 (2001)