白血病を標的とした新たな免疫細胞治療法の開発研究

• 研究課題/領域番号: 13218021
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 千葉 滋 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (60212049)
• 研究分担者: 鈴木 隆浩 東京大学, 医学部・附属病院, 医員 ; 熊野 恵城 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
• 研究期間 (年度): 2001 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 37,300千円 (直接経費: 37,300千円); 2004年度: 10,000千円 (直接経費: 10,000千円); 2003年度: 9,800千円 (直接経費: 9,800千円); 2002年度: 9,000千円 (直接経費: 9,000千円); 2001年度: 8,500千円 (直接経費: 8,500千円)
• キーワード: 白血病 / 造血器腫瘍 / 同種移植 / HLA / 造血幹細胞 / T前駆細胞 / Notch / Delta1 / 抗CD52モノクローナル抗体 / HLA不一致同種造血幹細胞移植 / NKT細胞 / 免疫 / 細胞療法 / ミニ移植 / CD52 / 慢性骨髄性白血病 / 融合遺伝子 / BCR / ABL / 腫瘍特異的抗原 / 樹状細胞

研究概要

白血病を中心とした造血器腫瘍を標的とし、HLA2座以上不一致の血縁者をドナーとして行う移植に関し、方法論改善に向けた開発的研究を行った。HLA2座以上不一致ドナーからの移植では、致死的な移植片対宿主病(GVHD)を回避するため、何らかの方法でT細胞を除去または強力に抑制することが必要である。我々は、抗CD52モノクローナル抗体を用いたin vivo T細胞除去法により臨床試験を行い、HLA2座以上不一致移植においても重症GVHDが回避可能であることを見出した。しかしこの方法では、免疫再構築の遅れが顕著であった。動物実験では、GVHDモデル系において、ドナーT細胞を除去してもT前駆細胞を造血幹細胞と共に輸注することにより重症GVHDを回避しつつ早期免疫再構築を図ることが明らかにされている。この原理を臨床に応用することに向けて研究を行い、以下の成果を得た。1.マウスストローマ細胞OP-9にNotchリガンドDelta1を発現させ、マウス造血幹細胞を共培養することにより、大量で均一なT前駆細胞が得られることを明らかにした。2.ヒト臍帯血中のCD133陽性細胞をマグネットビーズ法で純化し、サイトカインなどの存在下・無血清で培養したのち、重症免疫不全マウスへの移植実験を行うことにより、CD133陽性細胞が豊富に造血幹細胞を含み、これが無血清条件で増幅可能であることを明らかにした。3.ヒト臍帯血および末梢血のCD133陽性細胞を、Delta1を発現させたOP-9と共培養することにより、大量のT前駆細胞を産生しうることを見出した。今後、無血清条件、可溶型Delta1により同様にT前駆細胞を産生し、CD52モノクローナル抗体を用いたHLA不一致移植後に輸注する臨床試験に進むことを検討している。

研究成果

• [雑誌論文] AML1 Is Functionally Regulated through p300-mediated Acetylation on Specific Lysine Residues. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi Y, Chiba S, et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem 279 ページ: 15630-15638
• [雑誌論文] Stem cell leukemia protein directs hematopoietic stem cell fate. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kunisato A, Chiba S, et al.
  • 雑誌名: Blood 103 ページ: 3336-3341
• [雑誌論文] AML-1 is required for megakaryocytic maturation and lymphocytic differentiation, but not for maintenance of hematopoietic stem cells in adult hematopoiesis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ichikawa M, Chiba S, et al.
  • 雑誌名: Nature Med 10 ページ: 299-304
• [雑誌論文] Recovery of Valpha24(+) NKT cells after hematopoietic steal cell transplantation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi K, Chiba S, et al.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplant 34 ページ: 595-602
• [雑誌論文] In vivo alemtuzumab enables haploidentical HLA-mismatched hematopoietic stem cell transplantation without ex vivo graft manipulation.
  • 著者名/発表者名: Kanda Y, Chiba S, et al.
  • 雑誌名: Transplantation (in press)
• [雑誌論文] Graft-versus-tumor effect against advanced pancreatic cancer after allogeneic reduced-intensity stem cell transplantation.
  • 著者名/発表者名: Kanda Y, Chiba S, et al.
  • 雑誌名: Transplantation (in press)
• [文献書誌] Kunisato A: "Stem cell leukemia protein directs hematopoietic stem cell fate."Blood. (In Press). (2004)
• [文献書誌] Maekawa Y: "Delta1-Notch3 interactions bias the functional differentiation of activated CD4+ T cells."Immunity. 19. 549-559 (2004)
• [文献書誌] Takahashi T: "Valpha24+ natural killer T-cell responses against T-acute lymphoblastic leukaemia cells : implications for immunotherapy."Br J Haematol. 122. 231-239 (2003)
• [文献書誌] Takahashi T: "Dendritic cell vaccination for patients with chronic myelogenous leukemia."Leuk Res. 27. 795-802 (2003)
• [文献書誌] Saito T: "Notch2 Is Preferentially Expressed in Mature B Cells and Indispensable for Marginal Zone B Lineage Development."Immunity. 18. 675-685 (2003)
• [文献書誌] Kanda Y: "Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation from family members other than HLA-identical siblings over the last decade."Blood. 102. 1541-1547 (2003)
• [文献書誌] Kunisato A, Chiba S, Nakagami-Yamaguchi E, Kumano K, Saito T, Masuda S, Yamaguchi T, Osawa M, Kageyama R, Nakauchi H, Nishikawa M, Hirai H.: "HES-1 preserves purified hematopoietic stem cells ex vivo and accumulates side population cells in vivo"Blood. 101. 1777-1783 (2003)
• [文献書誌] Kawazu M, Kanda Y, Goyama S, Takeshita M, Nannya Y, Niino M, Komeno Y, Nakamoto T, Kurokawa M, Tsujino S, Ogawa S, Aoki K, Chiba S, Motokura T, Ohishi N, Hirai H.: "Rapid diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis by quantitative polymerase chain reaction using bronchial lavage fluid"Am J Hematol.. 72. 27-30 (2003)
• [文献書誌] Yamaguchi E, Chiba S, Kumano K, Kunisato A, Takahashi T, Hirai H.: "Expression of Notch ligands, Jagged1,2 and Deltal in antigen presenting cells in mice"Immunol Lett.. 81. 59-64 (2002)
• [文献書誌] Tanaka Y, Takahashi T, Nieda M, Masuda S, Kashiwase K, Ogawa S, Chiba S, Juji T, Hirai H.: "Generation of Fas-independent CD4+ cytotoxic T-cell clone specific for p190 minor bcr-abl fusion peptide"Leuk Res.. 26. 317-321 (2002)
• [文献書誌] Tanaka Y, Kanda Y, Kami M, Mori s, Hamaki T, Kusumi E, Miyakoshi S, Nannya Y, Chiba S, Arai Y, Mitani K, Hirai H, Mutou Y.: "Monitoring cytomegalovirus infection by antigenemia assay and two distinct plasma real-time PCR methods after hematopoietic stem cell transplantation"Bone Marrow Transplant. 30. 315-319 (2002)
• [文献書誌] Takahashi T, Chiba S, Nieda M, Azuma T, Ishihara S, Shibata Y, Juji T, Hirai H.: "Cutting edge : analysis of human v alpha 24+CD8+ NK T cells activated by alpha-galactosylceramide-pulsed monocyte-derived dendritic cells"J Immunol.. 168. 3140-3144 (2002)
• [文献書誌] Takahashi T, Chiba S, Matsumura T, Hirai H.: "A case of severe B cell deficiency after allogeneic stem cell transplantation"Bone Marrow Transplant. 30. 397-400 (2002)
• [文献書誌] Shimizu K, Chiba S, Saito T, Takahashi T, Kumano K, Hamada Y, Hirai H.: "Integrity of intracellular domain of Notch ligand is indispensable for cleavage required for release of the Notch2 intracellular domain"Embo J.. 21. 294-302 (2002)
• [文献書誌] Shimizu K, Chiba S, Saito T, Kumano K, Hamada Y, Hirai H.: "Functional diversity among Notch1, Notch2, Notch3 receptors"Biochem Biophys Res Commun.. 291. 775-779 (2002)
• [文献書誌] Saito A, Ogawa S, Mori S, Sakamaki H, Kami M, Miyakoshi J, Muto Y, Hatama T, Kawano M, Kinoshita M, Chiba S, Hirai H.: "Establishment of a quantitative method for detecting mixed chimerism using fluorescence-based PCR amplification of short tandem repeat markers after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation in a Japanese population"Rinsho Ketsueki. 43. 327-332 (2002)
• [文献書誌] Imai O, Kurokawa M, Izutsu K, Hangaishi A, Maki K, Ogawa S, Chiba S, Mitani K, Hirai H.: "Mutational analyses of the AML1 gene in patients with myelodysplastic syndrome"Leuk Lymphoma. 43. 617-621 (2002)
• [文献書誌] Goyama S, Kanda Y, Nannya Y, Kawazu M, Takeshita M, Niino M, Komeno Y, Nakamoto T, Kurokawa M, Tsujino S, Ogawa S, Aoki K, Chiba S, Motokura T, Shiratori Y, Hirai H.: "Reverse seroconversion of hepatitis B virus after hematopoietic stem cell transplantation"Leuk Lymphoma. 43. 2159-2163 (2002)
• [文献書誌] Chiba S, Saito A, Ogawa S, Takeuchi K, Kumano K, Seo S, Suzuki T, Tanaka Y, Saito T, Izutsu K, Yuji K, Masuda S, Futami s, Nishida M, Suzuki G, Gale RP, Fukayama M, Maekawa K, Hirai H.: "Transplantation for accidental acute high-dose total body neutron-and gamma-radiation exposure"Bone Marrow Transplant. 29. 935-939 (2002)
• [文献書誌] Takahashi T, Chiba S, Matsumura T, Hirai H.: "A case of severe B cell deficiency after allogeneic stem cell transplantation"Bone Marrow Transplant. 30. 397-400 (2002)
• [文献書誌] Shimizu K, Chiba S, Saito T, Takahashi T, Kumano K, Hamada Y, Hirai H.: "Integrity of intracellular domain of Notch ligand is indispensable for cleavage required for release of the Notch2 intracellular domain"Embo J.. 21. 294-302 (2002)
• [文献書誌] Shimizu K, Chiba S, Saito T, Kumano K, Hamada Y, Hirai H.: "Functional diversity among Notch1, Notch2, and Notch3 receptors"Biochem Biophys Res Commun.. 291. 775-779 (2002)
• [文献書誌] Takahashi, T.: "Analysis of human Va24+CD8+ natural killer T cells activated by a-galactosylceramide-pulsed monocyte-derived dendritic cells"J. Immunol. (in press).
• [文献書誌] Chiba, S.: "Transplantation for Accidental Acute High-Dose Total Body Neutron-and γ -Radiation Exposure"Bone Marrow Transplant. (in press).
• [文献書誌] Tanaka, Y.: "Generation of Fas-Independent CD4+ cytotoxic T-cell clone specific for p190 minor bcr-ab1 fusion peptide"Leukemia Res. 26. 317-321 (2002)
• [文献書誌] Yamaguchi, E.: "Expression of Nocth ligand, Jagged1, Jagged2 and Delta1 in antigen-presenting cells in mice"Immunol. Letter. 81. 59-64 (2002)
• [文献書誌] Shimizu, K.: "Integrity of intracellular domain of Notch ligand is indispensable for cleavage required for release of Notch2 intracellular domain"EMBO J.. 21. 294-302 (2002)
• [文献書誌] Kumano, K.: "Notch1 inhibits differentiation of hematopoietic cells by sustaining GATA-2 expression"Blood. 98. 3283-3289 (2001)