| 研究課題/領域番号 |
13218029
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| 研究種目 |
特定領域研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
辻 浩一郎 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (50179991)
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| 研究分担者 |
真部 淳 東京大学, 医科学研究所, 助手 (20292849)
山下 直秀 東京大学, 医科学研究所, 教授 (90174680)
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| 研究期間 (年度) |
2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
2001年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
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| キーワード | 神経芽細胞腫 / 遺伝子治療 / interleukin-2 / lymphotactin |
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| 研究概要 |
1)再発性・治療不応性神経芽細胞腫に対する遺伝子治療のための基礎的検討 再発性・治療不応性神経芽細胞腫に対する遺伝子治療実施の可能性の検討のために、進行性神経芽細胞腫患者の骨髄細胞からの神経芽細胞腫細胞の初代培養法の確立を試みた。stageIVの神経芽細胞腫患児の親権者より同意を得た後、10例の患児から採取された骨髄細胞を用いて培養を開始した。骨髄単核細胞をEHS-Natrixを塗布されたプラスチックフラスコに入れ、10%ウシ胎仔血清添加RPMI-1640液中で培養した。継代にはトリプシン+EDTAを用いた。神経芽細胞腫細胞の同定は、光顕的観察、フローサイトメトリーによる細胞表面GD2発現解析、組織免疫染色によるNeurofilament、NSE等の発現解析、RT-PCRによるTyrosine hydroxylaseの検出等により行った。その結果、4例において、7-14日後に神経芽細胞腫細胞の増殖が見られた。3例が初発時の凍結骨髄、1例が再発時の新鮮骨髄であった。増殖した神経芽細胞腫細胞には、比較的容易にinterleukin(IL)-2およびlymphotactin遺伝子の導入が可能であった。
2)再発性・治療不応性神経芽細胞腫に対する遺伝子治療プロトコールの提案 上記の基礎的検討結果に基づき、遺伝子治療プロトコールを作成し、東京大学医科学研究所倫理審査委員会に提出した。その審査を経た後、文部科学省科学技術・学術審議会および厚生科学審議会科学技術部会に「再発性・治療不応性神経芽腫に対するサイトカインとケモカインを用いた免疫遺伝子治療(第I相臨床研究)」として申請を行った。現在その審議の結果を待っている段階である。
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