| 研究課題/領域番号 |
13307052
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
形態系基礎歯科学
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| 研究機関 | 日本歯科大学 |
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研究代表者 |
青葉 孝昭 日本歯科大学, 歯学部, 教授 (30028807)
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| 研究分担者 |
田谷 雄二 日本歯科大学, 歯学部, 講師 (30197587)
柳下 寿郎 日本歯科大学, 歯学部, 助教授 (50256989)
佐藤 かおり 日本歯科大学, 歯学部, 講師 (90287772)
島津 徳人 日本歯科大学, 歯学部, 講師 (10297947)
橋本 修一 日本歯科大学, 歯学部, 助教授 (50050688)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
53,040千円 (直接経費: 40,800千円、間接経費: 12,240千円)
2004年度: 8,320千円 (直接経費: 6,400千円、間接経費: 1,920千円)
2003年度: 8,320千円 (直接経費: 6,400千円、間接経費: 1,920千円)
2002年度: 8,320千円 (直接経費: 6,400千円、間接経費: 1,920千円)
2001年度: 28,080千円 (直接経費: 21,600千円、間接経費: 6,480千円)
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| キーワード | マウス顎顔面形成 / マウス / 遺伝子改変モデル / 奇形 / マスター遺伝子 / μCT / 立体構築 / microdissection / 顎顔面形成 / 遺伝子改変マウス / 二次口蓋 / 舌原基 / メッケル軟骨 / 歯胚 / 顎関節 / 歯胚発生 / 舌発生 / 細胞形質転換 / 細胞死 / 上皮間葉相互作用 / 上皮間葉転換 |
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| 研究概要 |
本研究では、特定の遺伝子欠損に起因する口腔顎顔面領域の表現型異常を病理組織学的に検索するとともに、その背景をなす遺伝子欠損に随伴した分子間ネットワークの破綻を調べることにより、口腔顎顔面奇形の細胞分子レベルでの発症機序の解明をめざす。とりわけ、顎顔面領域の多彩な表現型変異のうちで、(1)先天性奇形のうちでも発症頻度の高い口蓋裂と、(2)メッケル軟骨・下顎骨体の形成異常、(3)複雑な組織発生・構造を示す顎関節部の形成障害、および(4)舌の初期発生と異常に注目した。最終年度にあたり、前年度までに設計したRT-PCRおよびリアルタイムPCR用のプローべ80種類を用いて、異なる胎生時期のマウス二次口蓋突起と舌原基での遺伝子発現ネットワークの解析を完了した。さらに、レーザ顕微切断法(Laser-capture microdissection)による口蓋突起上皮でのsnailおよびRhoファミリー、舌筋形成における筋芽細胞分化のマスター遺伝子(Pax3、Myf5、myogenin)のmRNA発現について解析した。遺伝子改変モデルとして、TGFβ3、δEF1、Endothelinlの欠損マウスに加えてKlotho(-/-)の解析を完了した。これらの動物モデルでの顎顔面の発生・成長を視覚的に捉えるため、アリザリンレッド・アルシアンブルー二重染色による骨格標本、エックス線μCT画像、連続染色標本での立体構築像、血管造影による立体画像法を確立し、異なる胎生日齢でのマウス頭蓋全体および諸器官(鯰弓、舌、顎関節、メッケル軟骨、歯胚)を3次元動画観察できるデータベースを構築した。これらの画像情報については、平成16年度に購入したサーバに保管し、その一部はWebサイト(http://www.ndu.ac.jp/~pathhome)に掲載している。
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