遺伝子介入による腫瘍の放射線治療法開発の基礎的研究

• 研究課題/領域番号: 13470187
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 放射線科学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 續 輝久 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (40155429)
• 研究分担者: 藏 忍 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (90037391) ; 中村 和正 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (20284507) ; 佐々木 茂貴 九州大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (10170672) ; 中津 可道 九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (00207820) ; 森田 隆 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (70150349)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 14,500千円 (直接経費: 14,500千円); 2003年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円); 2002年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円); 2001年度: 7,500千円 (直接経費: 7,500千円)
• キーワード: DNA損傷 / DNA修復系 / 細胞死 / 合成オリゴマー / DNA組換え / アンチジーン / 放射線感受性 / 遺伝子導入 / DNA組み換え

研究概要

Rad51遺伝子は、放射線やアルキル化剤等によるDNA二重鎖切断の組換え修復に関与している。これまでの実験の結果、Rad51遺伝子が細胞の増殖に必須であることを明らかにした。この成果に基づき、マウスの培養細胞系において、Rad51遺伝子のアンチセンスDNA導入により、放射線感受性が増大することが明らかとなっている。従って、Rad51遺伝子のsiRNAをがん細胞に導入して、その遺伝子発現をRNAi(RNA interference)の機構により抑制することで、がん細胞の放射線に対する感受性を高め、低線量でのがん治療あるいは耐性がんの克服が可能と考えられる。
マウステラトカルシノーマF9細胞に、Rad51遺伝子の配列を含むsiRNAをトランスフェクションして1日後にX線を照射し、細胞の放射線感受性を検討した。MTTアッセイにより、細胞毒性を調べた結果、Rad51-siRNAを導入した場合、X線に対する感受性が増加した。このような増感効果は2Gyからみられた。さらに、抗癌剤シスプラチンについてもその感受性が増加することが明らかとなった。MTTのOD値を50%に減少させるシスプラチン濃度は、0.4μMから、0.2μMと1/2に減少した。X線やDNA二重鎖切断する抗癌剤治療においてRad51遺伝子のRNAiによる抑制は増感効果をもたらすことが明らかになった。さらに、Rad51遺伝子の発現をRNAiで抑制したF9細胞にX線とシスプラチンの両方の処理を行った場合、相加的であるが、有効であることがわかった。

研究成果

• [文献書誌] Sakumi, K.et al.: "Ogg1-knockout-associated lung tumorigenesis and its suppression by the Mth1 gene disruption."Cancer Res.. 63. 902-905 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Yoshida, K.et al.: "Expression and radiation-induced phosphorylation of histone H2AX in mammalian cells."J.Radiat.Res.. 44. 47-51 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nakamura, K.et al.: "Radical radiationtherapy for prostate cancer in Japan : A patterns of care study report."Jpn.J.Clin.Oncol.. 33. 122-126 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sasaki, S.et al.: "Selective formation of stable triplexs including a TA or a CG interrupting site with new bicyclic nucleoside analogs (WNA)."J.Amer.Chem.Soc.. 126. 516-528 (2004)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Habu, T.et al.: "P53 protein interacts specifically with the meiosis-specific mammalian RecA-like protein DMC1 in meiosis."Carcinogenesis. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Shibahara, K.et al.: "Targeted disruption of one allele of the Y-box binding protein-1(YB-1) gene in mouse embryonic stem cells and increased sensitivity to cisplatin C."Cancer Sri.. 95. 348-353 (2004)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sakumi, K. et al.: "Ogg1-knockout-associated lung tumorigenesis and its suppression by the Mth1 gene disruption."Cancer Res.. 63. 902-905 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yoshida, K et al.: "Expression and radiation -induced phosphorylation of histone H2AX in mammalian cells."J.Radiat.Res.. 44. 47-51 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nakamura, K. et al.: "Radical radiation therapy for prostate cancer in Japan : A patterns of care study report."Jpn.J.Clin.Oncol.. 33. 122-126 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sasaki, S. et al.: "Selective formation of stable triplex including a TA or a CG interrupting site with new bicyclic nucleoside analogs(WNA)."J.Amer.Chem.Soc.. 126. 516-528 (2004)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Shibahara, K. et al.: "Targeted disruption of one allele of the Y-box binding protein-1(YB-1) gene in mouse embryonic stem cells and increased sensitivity to cisplatin and mitomycin C."Cancer Sci.. 95. 348-353 (2004)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Habu, T. et al.: "P53 protein interacts specifically with the meiosis-specific mammalian RecA-like protein DMC1 in meiosis."Carcinogenesis. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sakumi, K. et al.: "Ogg1-knockout-associated lung tumorigenesis and its suppression by the Mth1 gene disruption."Cancer Res.. 63. 902-905 (2003)
• [文献書誌] Yoshida, K. et al.: "Expression and radiation-induced phosphorylation of histone H2AX in mammalian cells."J.Radiat.Res.. 44. 47-51 (2003)
• [文献書誌] Nakamura, K. et al.: "Radical radiation therapy for prostate cancer in Japan : A patterns of care study report."Jpn.J.Clin.Oncol.. 33. 122-126 (2003)
• [文献書誌] Sasaki, S. et al.: "Selective formation of stable triplexes including a TA or a CG interrupting site with new bicyclic nucleoside analogs (WNA)."J.Amer.Chem.Soc.. 126. 516-528 (2004)
• [文献書誌] Shibahara, K. et al.: "Targeted disruption of one allele of the Y-box binding-1 (YB-1) gene in mouse embryonic stem cells and increased sensitivity to cisplatin..."Cancer Sci.. (in press). (2004)
• [文献書誌] Habu, T. et al.: "P53 protein interacts specifically with the meiosis-specific mammalian RecA-like protein DMC1 in meiosis."Carcinogenesis. (in press). (2004)
• [文献書誌] Egashira A. et al.: "Mutational specificity of mice defective in the MTH1 and/or MSH2 genes"DNA Repair. 1・11. 881-893 (2002)
• [文献書誌] Sekiguchi, M., Tsuzuki, T.: "Oxidative nucleotide damage : consequences and prevention"Oncogene. 21. 8895-8904 (2002)
• [文献書誌] Doi, T.et al.: "Induction of instability of p34(cdc2)ewpression by treatment with cisplatin (CDDP)in mouse teratocarcinoma F9 cells"Cancer Lett.. 176. 75-80 (2002)
• [文献書誌] Yamaguchi, K. et al.: "ERT following IORT improves survival of patients with respective pancreatic cancer"Gastroenterology. (in press). (2003)
• [文献書誌] Nagatusgi, F. et al.: "Site-specific mutagenesis by triple-helix forming oligonucleotides containing a reactive nucleoside analogue"Nuclec Acids Res.. (in press). (2003)
• [文献書誌] Sakumi, K. et al.: "Ogg1-knockout-associated lung tumorigenesis and its suppression by the Mth1 gene disruption"Cancer Res. 63(in press). (2003)
• [文献書誌] Doi, T.et al.: "Induction of instability of p34 (cdc2) expression by treatment with cisplatin (CDDP) in mouse teratocarcinoma F9 cells"Cancer Lett. 176・1. 75-80 (2002)
• [文献書誌] Tsuzuki, T. et al.: "Spontaneous tumorigenesis in mice defective in the MTH1 gene encoding 8-oxo-dGTPase"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 11456-11461 (2001)
• [文献書誌] Tsuzuki, T. et al.: "Analysis of MTH1 gene function in mice with targeted mutagenesis"Mutat. Res. 477. 71-78 (2001)
• [文献書誌] Sasaki, S.: "Active oligonucleotides incorporating alkylating agent as potential sequence-and base selective modifier of gene expression"Eur. J. Phar. Sci. 13・1. 43-51 (2001)
• [文献書誌] Nagatusugi, F. et al.: "A new reactive nucleotide analog for highly reactive and selective cross-linking reaction to cytidine under neutral conditions"Bioorg. & Med. Chem. Lett. 11・19. 2577-2579 (2001)
• [文献書誌] Nakamura, K. et al.: "Relapse pattern of localized non-Hodgkin's lymphoma of the head and neck after clinical remission : results of a strict follow-up procedure"Int. J. Clin. Oncol. 6. 302-305 (2001)