| 研究課題/領域番号 |
13556014
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
応用微生物学・応用生物化学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
江崎 信芳 京都大学, 化学研究所, 教授 (50135597)
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| 研究分担者 |
山下 裕兄 タカラバイオ株式会社, プロジェクトマネージャー
三原 久明 京都大学, 化学研究所, 助手 (30324693)
栗原 達夫 京都大学, 化学研究所, 助手 (70243087)
山田 英 ドラゴンジェノミクス(株), 取締役副社長
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
14,100千円 (直接経費: 14,100千円)
2002年度: 4,800千円 (直接経費: 4,800千円)
2001年度: 9,300千円 (直接経費: 9,300千円)
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| キーワード | 好冷細菌 / 好冷菌 / 低温菌 / Shewanella / Acinetobacter / ゲノム解析 / 低温適応 / 低温活性酵素 / 好冷酵素 / 形質転換 / 宿主-ベクター系 / Shewanella sp.Ac10 / Acinetobacter sp.strain no.6 / 宿主ベクター系 / 脂質分解酵素 |
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| 研究概要 |
1.南極海水から単離した好冷細菌Shewanella sp. Ac10の全ゲノム解析を行った。ゲノムサイズは4.5Mbp、ORF数は約4,800であった。
2.4℃で生育したShewanella sp. Ac10において、Escherichia coliのコールドショックタンパク質CspAのホモログが高生産されていることを明らかにした。
3.Shewanella sp. Ac10のコラゲナーゼ遺伝子の発現系を構築し、酵素の諸性質を明らかにした。
4.Shewanella sp. Ac10の形質転換法を確立するとともに、本菌で機能するプロモーターを単離し、発現ベクターを構築した。
5.シベリアの永久凍土から、4℃で生育し、37℃で生育しない好冷細菌Acinetobacter sp. DWC6を単離した。本菌は、脂質分解酵素を分泌し、培地中のトリグリセリドなどを低温で効率よく分解した。本菌は低温環境での廃水処理に有用と考えられた。
6.Acinetobacter sp. DWC6から、脂肪酸ビニルエステルを良好な基質とする低温活性脂質分解酵素の遺伝子を単離した。ビニルエステルをアシル供与体とするエステル交換反応によってエステルを合成する上で有用な酵素であると考えられた。
7.Acinetobacter sp. DWC6から、エステラーゼリパゼジャミリー内のESTグループに属する低温活性エステラーゼをコードする遺伝子を単離した。
8.Acinetobacter sp. DWC6を宿主とするベクターを開発するとともに、外来遺伝子高発現に適した強力なプロモーターを単離した。
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