| 研究課題/領域番号 |
13557002
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
解剖学一般(含組織学・発生学)
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| 研究機関 | 島根大学(医学部) |
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研究代表者 |
大谷 浩 島根大学, 医学部, 教授 (20160533)
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| 研究分担者 |
宇田川 潤 島根大学, 医学部, 助手 (10284027)
橋本 龍樹 島根大学, 医学部, 助手 (90252907)
八田 稔久 島根大学, 医学部, 助教授 (20238025)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
13,600千円 (直接経費: 13,600千円)
2003年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2002年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2001年度: 7,400千円 (直接経費: 7,400千円)
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| キーワード | マウス胎児 / 子宮外発生法 / specific antagonist / neuropeptide Y / enzyme inhibitor / レポーター遺伝子 / イボテン酸 / メラノコルチン / ニューロペプチドY / 受容体アンタゴニスト / 甲状腺刺激ホルモン放出因子 / gp^<130> / レプチン |
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| 研究概要 |
標的分子の機能を、器官形成期から新生児期にわたり、特異的antagonistによって時期・部位特定的に抑制する実験系の確立を目標とした。子宮外発生法によって胚操作が可能であった実験期間をより早期に延ばす一方、新生児期についても抑制実験を行った。分子特異的な機能抑制については、予備実験の後、神経内分泌系における特異的antagonistの効果に焦点を絞って実験を行った。
1.胎児操作・導入技術の改善
導入時期を早め、かつ導入分子の効果の持続性を確認するため、マウス妊娠7から10日に羊水中へレポーター遺伝子ベクターを注入して皮膚へ遺伝子導入を試みた。注入胚の約4分の1が出生し、遺伝子導入を確認することができた。したがって、妊娠7から10日までは羊水内へ、11日以降出生までは子宮外発生法により児へ直接注入する実験系がほぼ確立した。一方、特異的antagonistの効果をより長時間持続させるため、抑制物質を吸着させたビーズを注入する方法については、現在まで明らかな抑制効果の延長は認められておらず、さらに検討が必要である。
2.特異的機能抑制分子の胎児への導入とその効果の検討
予備実験に基づいて、neuropeptide Y (NPY)およびNPY Y1受容体の特異的antagonist (NPY-A)の注入による比較実験系を用いて研究を進めた。胎児期への導入実験については未だ再現性のある所見を得るに至っていないが、新生児期の実験におけるNPYとNPY-Aの投与により、脳における神経細胞の髄鞘形成について、NPYとNPY-Aにより、部位特異的にミエリン塩基性タンパクのmRNA、タンパク陽性細胞数等、膠細胞の分化に関して両群間で差を認めた。
以上、組織形成期における子宮外発生法を含めた、器官形成期から新生児期に至る一連の胚操作および特異的分子機能の抑制実験系を考案した。
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