| 研究課題/領域番号 |
13557190
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
歯周治療系歯学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
村上 伸也 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (70239490)
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| 研究分担者 |
野崎 剛徳 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (30263304)
池澤 一彦 大阪大学, 歯学部附属病院, 講師 (80294114)
島袋 善夫 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助教授 (50231361)
松原 謙一 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 客員教授
山田 聡 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (40359849)
高山 真一 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (00314386)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
12,100千円 (直接経費: 12,100千円)
2003年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2002年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2001年度: 9,300千円 (直接経費: 9,300千円)
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| キーワード | 歯根膜 / DNAマイクロアレイ / 遺伝子発現 / 歯周病 / 歯根膜細胞分化 / 遣伝子発現 / 骨芽細胞 / セメント芽細胞 / ヒト歯根膜 / 3'末端cDNAライブラリ / gene expression profile / DNAチップ / Gene signature / BodyMap |
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| 研究概要 |
1.ヒト歯根膜組織遺伝子発現プロファイル解析:ヒト歯根膜から作製したヒト歯根膜3'末端cDNAライブラリでのランダムシークエンス法により、ヒト歯根膜組織遺伝子発現プロファイルを作成、解析し、ヒト歯根膜組織における網羅的な遺伝子発現状況を明らかとした。
2.新規の歯根膜特異的遺伝子PLAP-1の同定とその解析:ヒト歯根膜組織遺伝子発現プロファイル解析により、新規プロテオグリカンをコードする遺伝子PLAP-1(periodontal ligament associated protein-1)の同定に成功し、同遺伝子が歯根膜の恒常性維持に重要な役割を担っていることを解明した。
3.ヒト歯根膜由来カスタマイズドDNAチップの作製:ヒト歯根膜組織遺伝子発現プロファイルの解析結果をもとに、3'末端cDNAライブラリの約1200個のcDNAを増幅し、スライドガラス上に固定化することにより、ヒト歯根膜由来カスタマイズドDNAチップ(PerioGen Chipと命名)を開発した。
4.ヒト歯根膜細胞の分化過程において変化する遺伝子群の解析:ヒト歯根膜細胞を硬組織形成細胞へと細胞分化誘導した際の遺伝子発現変化を、PerioGen Chipを用いて網羅的に解析した結果、細胞分化に伴って経日的にその発現量が変化する遺伝子群の同定に成功した。さらに、同定した遺伝子群の中で、特に高い発現上昇を認めたDAN, Periostin遺伝子について、分子生物学的・細胞生物学的解析を行った結果、同遺伝子は、歯根膜の細胞分化過程を制御していることが明らかとなった。
5.歯周病罹患部歯周組織における遺伝子発現解析:歯周病患者から歯周外科手術時に採取した歯周組織と培養歯肉線維芽細胞とにおける遺伝子発現をPerioGen Chipにて解析することにより、PerioGen Chipの歯周病病態診断への応用に向けたin vivoにおける遺伝子発現解析を行った。その結果、歯周病罹患部位で高い発現を示す遺伝子群が同定され、in vivo組織からの微量サンプルを用いた遺伝子発現解析が可能であり、PerioGen Chipの臨床応用への可能性が示された。
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