| 研究課題/領域番号 |
13558088
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
生物物理学
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| 研究機関 | 早稲田大学 |
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研究代表者 |
船津 高志 早稲田大学, 理工学部, 教授 (00190124)
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| 研究分担者 |
月田 承一郎 京都大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50155347)
庄子 習一 早稲田大学, 理工学部, 教授 (00171017)
根本 直人 (株)GEN COM, 研究開発1室, 主任研究員
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
14,100千円 (直接経費: 14,100千円)
2003年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2002年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
2001年度: 7,300千円 (直接経費: 7,300千円)
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| キーワード | マイクロシステム / 分子ソーター / 1分子検出 |
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| 研究概要 |
タンパク質相互作用解析を明らかにする有効な手段として、オルガネラなどの超分子複合体の単離・精製を行い、構成生体分子の同定する方法がある。これを実現するため、超分子複合体の検出・単離を微小流路(入り口が1つ、出口が2つのT字型流路、流路幅30μm、深さ5μm)で行う生体分子ソーターを開発した。微細加工技術でチップ内に作られた従来のバルブは開閉に数秒の時間を要し、しかも可逆的でないなど、実用的ではなかった。この問題を解決するために、キャリア溶液に37℃を境に高温でゲル、低温でゾルと可逆的な相転移を起こす熱感受性ハイドロゲルを加えておき、赤外レーザー(1480nm:水の極大吸収波長)の局所加熱によって分岐した流路の一方にゲルによる栓(ゲルバルブ)を形成させ、それを切り替えることによって流れの制御を可能とした。単離する超分子複合体をGFPなどの蛍光物質で標識しておき、それらが発する蛍光を光電子倍増管によって検出し、バルブを切り替えた。ゲルバルブの開閉に要する時間は4msであり、ビデオでは撮影できないほど高速な流体制御が可能になった。連続な自動運転が可能であり、十万個の粒子を分離することが可能であった。さらに、この流路に分離した生体試料を回収するために流路を組み込むことにより、回収することに成功した。実際に生体分子や細胞の検出・分離・精製が可能であることを、蛍光標識したaファージDNA、大腸菌、好中球などで確認した。
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