中枢神経機能解析のための弱毒単純ヘルペスウイルスベクター系の開発

• 研究課題/領域番号: 13558094
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 展開研究
• 研究分野: 神経化学・神経薬理学
• 研究機関: 富山医科薬科大学
• 研究代表者: 白木 公康 富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (50135745)
• 研究分担者: 黒川 昌彦 富山医科薬科大学, 医学部, 助教授(前) (80186527)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 13,100千円 (直接経費: 13,100千円); 2004年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 2003年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 2002年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円); 2001年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
• キーワード: 単純ヘルペスウイルス / ベクター / 遺伝子治療 / 神経機能 / 脊髄前角細胞 / 遺伝子発現 / ウイルスベクター / 中枢神経系 / 潜伏感染 / 単純ヘルペスウイルスベクター / 脊髄前角運動細胞 / 神経親和性 / 弱毒ウイルス / 遺伝子発現ベクター

研究概要

中枢神経系内で、外来遺伝子を発現する実験系あるいは遺伝子治療のベクターとして、私たちは,単純ヘルペスウイルス(HSV)の神経親和性の特徴から、βガラクトシダーゼ(β-gal)を発現する弱毒単純ヘルペスウイルス(HSV)をベクター作製し、広範囲への遺伝子導入が可能で,中枢神経系での長期にわたる安定した遺伝子発現が可能なベクターを開発した(Neurosci Lett 245:69-72、Gene Ther 7:934-941)。本ベクターでは弱毒性によりほぼ病原性をコントロールし各遺伝子の発現を望む領域を制御できることを本研究で明らかにした。すなわち、筋肉内接種により、病原性を示すことなく、脊髄前角神経細胞で外来遺伝子を長期にわたり発現できることを確認した(Gene Therapy 7:934-941)。そして,HSVに免疫を有する動物でも遺伝子発現ができることと同じ接種ルートを使用して複数個の遺伝子を導入できる可能性を確認した(Gene Therapy 8:1180-1187)。さらに,抗ウイルス薬ガンシクロビル(GCV)により、発現領域の制御でき、本ウイルスベクターの増殖・発現領域の制御・潜伏感染化の過程における外来遺伝子発現と生理学的機能(Acoustic Startle ResponseとPrepulse Inhibition)に影響しないことを確認した(Neurosci Res 45:233-241、この論文は「hottopic」journal articleとされた)。また、脊髄前角細胞での遺伝子発現に伴う前角細胞機能と神経伝導速度の変化と筋肉における遺伝子発現について検討をほぼ終えて、投稿を準備している。この過程で、このベクターにより、ヌードマウスで移植脳腫瘍の治療に使用できることを明らかにした(Cancer Sci 95:990-998)。

研究成果

• [雑誌論文] Growth of herpes simplex virus in epidermal keratinocytes determines cutaneous pathogenicity in mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yoshida Y, Li Z-H, Kurokawa M, Kawana T, Imakita M, Shiraki K.
  • 雑誌名: Journal of Mededical Virology 75 ページ: 421-426
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Growth of herpes simplex virus in epidermal keratinocytes determines cutaneous pathogenicity in mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yoshida Y, Li Z-H, Kurohawa M, Kawana T, Imakita M, Shiraki K.
  • 雑誌名: J Med Virol 75 ページ: 421-426
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Comparative anti-varicella-zoster virus efficacy of acyclovir and vidarabine. (2005)
  • 著者名/発表者名: Miwa N, Kurosaki K, Yoshida Y, Kurokawa M, Saito S, Shiraki K.
  • 雑誌名: Antiviral Research 65 ページ: 49-55
• [雑誌論文] Suppression of generation and replication of acyclovir-resistant herpes simplex virus by its sensitive virus. (2004)
  • 著者名/発表者名: Okuda T, Kurokawa K, Matsuo K, Honda M, Niimura M, Shiraki, K.
  • 雑誌名: Journal of Medical Virology 72 ページ: 112-120
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Herpes simplex virus induced death receptor-dependent apoptosis and regression of transplanted human cancers. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kamiyama H, Kurosaki K, Kurimoto M, Katagiri T, Nakamura Y, Kurokawa M, Sato H, Endo S, Shiraki K.
  • 雑誌名: Cancer Science 95 ページ: 990-998
  • NAID: 10014260689
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Regulation of varicella-zoster virus induced cell-to-cell fusion by the endocytosis competent glycoproteins gH and gE. (2004)
  • 著者名/発表者名: Pasieka TJ, Shiraki K, Grose C.
  • 雑誌名: Journal of Virology 78 ページ: 2884-2896
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Effects of suppression of acute herpetic pain by gabapentin and amitriptyline on the incidence of delayed postherpetic pain in mice. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kuraishi Y, Takasaki I, Nojima H, Shiraki K, Takahara H.
  • 雑誌名: Life Sciences 74 ページ: 2619-2626
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Suppression of generation and replication of acyclovir-resistant herpes simple virus by its sensitive virus. (2004)
  • 著者名/発表者名: Okuda T, Kurokawa K, Matsuo K, Honda M, Niimura M, Shiraki, K.
  • 雑誌名: J Med Virol 72 ページ: 112-120
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Effects of suppression of acute herpetic pain by gabapentin and amitriptyline on he incidence of delayed postherpetic pain in mice. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kuraishi Y, Takasaki I, Nojima H, Shiraki K, Takahara H.
  • 雑誌名: Life Sciences 74 ページ: 2619-2626
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Herpes simplex virus induced death receptor-dependent apoptosis and regression of transplanted human cancers. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kamiyama H, Kurosaki K, Kurimoto M, Katagiri T, Nakamura Y, Kurokawa M, Sato H, Endo S, Shiraki K.
  • 雑誌名: Cancer Sci 95 ページ: 990-998
  • NAID: 10014260689
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Regulation of varicella-zoster virus Induced cell-to-cell fusion by the endocytosis competent glycoproteins gH and gE. (2004)
  • 著者名/発表者名: Pasieka TJ, Shiraki K, Grose C.
  • 雑誌名: J virol 78 ページ: 2884-2896
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Suppression of generation and replication of acyclovir-resistant herpes simplex virus by its sensitive virus. (2004)
  • 著者名/発表者名: Okuda T, Kurokawa K, Matsuo K, Honda M, Niimura M, Shiraki, K.
  • 雑誌名: J Medical Virology 72 ページ: 112-120
• [雑誌論文] Regulation of varicella-zoster virus induced cell-to-cell fusion by the endocytosis competent glycoproteins gH and gE. (2004)
  • 著者名/発表者名: Pasieka TJ, Shiraki K, Grose C.
  • 雑誌名: J Virology 78 ページ: 2884-2896
• [雑誌論文] Tropism of varicella-zoster virus to hepatocytes in its pathogenesis and tropism of Oka varicella vaccine to dermal fibroblasts in its attenuation. (2003)
  • 著者名/発表者名: Shiraki K, Yoshida Y, Asano Y, Yamanishi K, Takahashi M.
  • 雑誌名: Journal of Infectious Diseases 188 ページ: 1875-1877
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Regulated transgene delivery by ganciclovir in the brain without physiological alterations by a live attenuated herpes simplex virus vector. (2003)
  • 著者名/発表者名: Fukuda Y, Yamamura J, Uwano T, Nishijo H, Kurohawa M, Fukuda M, Ono T, Shiraki K.
  • 雑誌名: Neurosci Res 45 ページ: 233-241
  • NAID: 50000245954
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of cell-mediated and humeral immunity to hepatitis B surface antigen by a novel adjuvant activity of Oka varicella vaccine. (2003)
  • 著者名/発表者名: Phumiamorn S, Sato H, Kamiyama T, Kurohawa M, Shiraki K.
  • 雑誌名: J Gen virol 84 ページ: 287-291
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Tropism of varicella-zoster virus to hepatocytes in its pathogenesis and tropism of Oka varicella vaccine to dermal fibroblasts in its attenuation. (2003)
  • 著者名/発表者名: Shiraki K, Yoshida Y, Asano Y, Yamanishi K, Takahashi M.
  • 雑誌名: J Infect Dis 188 ページ: 1875-1877
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Effects of analgesias on delayed postherpetic pain in mice. (2002)
  • 著者名/発表者名: Takasaki I, Sasaki A, Andoh T, Nojima H, Shiraki K, Kuraishi Y.
  • 雑誌名: Anesthesiology. 96 ページ: 1168-1174
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Analysis of herpes simplex virus isolated from the genital lesions since 1977 in Japan. (2001)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa T, Kawana T, Okuda T, Tsukada T, Horii M, Shiraki K.
  • 雑誌名: J Med Virol 63 ページ: 57-63
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Gabapentin antinociception in mice with acute herpetic pain induced by herpes simplex virus infection. (2001)
  • 著者名/発表者名: Tahasaki I., Andoh T., Nojima H., Shiraki K., Kuraishi Y.
  • 雑誌名: J Pharmacol Exp Therapeut 296 ページ: 270-275
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Effect of immunity on gene delivery into anterior horn motor neurons by live attenuated herpes simplex virus vector. (2001)
  • 著者名/発表者名: Kamiyama H, Kurimoto M, Yamamura J, Uwano T, Hirashima Y, Kurohawa M, Endo S, Shiraki K.
  • 雑誌名: Gene Therapy 8 ページ: 1180-1187
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Characterization of the DNA polymerase gene of varicella-zoster viruses resistant to acyclovir. (2001)
  • 著者名/発表者名: Kamiyama T, Kurohawa M, Shiraki K.
  • 雑誌名: J Gen virol 82 ページ: 2761-2765
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Effect of long-term low-dose acyclovir suppressive therapy on susceptibility to acyclovir and frequency of acyclovir-resistance of herpes simplex virus type 2. (2001)
  • 著者名/発表者名: Honda M, Okuda T, Hasegawa T, Kurohawa M, Shiraki K, Komatsuzaki M, Matsuo K, Niimura M.
  • 雑誌名: Antiviral Chem Chemother 12 ページ: 243-249
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Varicella-zoster virus gH : gL contains a structure reactive with the anti-human gamma chain of IgG near the glycosylation site. (2001)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, T., Ayabe, S., Miyagi, H., Sugano, T., Otsu, A., Sato, H., Kageyama, S., Fujii, T., Shiraki, K.
  • 雑誌名: J Gen virol 82 ページ: 331-334
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Latent gene expression of a live attenuated herpes simplex virus in the spinal cord of rats without electrophysiological alteration.
  • 著者名/発表者名: Kurohawa M, Sato H, Yoshida Y, Kurosahi K, Phumiamorn S, Tamura R, Ono T, Yamamura J, Shiraki K.
  • 雑誌名: (manuscript in preparation)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kurokawa, M., Brown, J., Kagawa, Y., Shiraki, K.: "Cytokine-regulatory activity and therapeutic efficacy of cinnamyl derivatives in endotoxin shock"Eur.J.Pharm.. 474. 283-293 (2003)
• [文献書誌] Okuda, T., Kurokawa, M., et al.: "Suppression of generation and replication of acyclovir-resistant herpes simplex virus by a sensitive virus"J.Med.Virol.. 72. 112-120 (2004)
• [文献書誌] Fukuda, Y., Yamamura, J.et al.: "Regulated transgene delivery by ganciclovir in the brain without physiological alterations by a live attenuated herpes simplex virus vector"Neuroscience Res.. 45. 233-241 (2003)
• [文献書誌] Phumiamorn, S., Sato, H.et al.: "Induction of humoral and cell-mediated immunity to hepatitis B surface antigen by a novel aduvant activity of Oka varicella vaccine"J.Gen.Virol.. 84. 287-291 (2003)
• [文献書誌] Lipipun V., Kurokawa M.et al.: "Efficacy of Thai medicinal plant extracts against herpes simplex virus type 1 infection in vitro and in vivo"Antiviral Res.. 60. 175-180 (2003)
• [文献書誌] Sato, H., Yamamura, J.et al.: "Superiority of varicella skin test antigen over purified varicella-zoster virus glycoproteins in monitoring booster response to Oka varicella vaccine"Vaccine. 22. 15-20 (2003)
• [文献書誌] Shiraki K, Yoshida Y, Asano Y, Yamanishi K, Takahashi M.: "Tropism of varicella-zoster virus to hepatocytes in its pathogenesis and tropism of Oka varicella vaccine to dermal fibroblasts in its attenuation"J.Infect.Dis.. 188. 1875-1877 (2003)
• [文献書誌] Fukuda Y et al.: "Regulated transgene delivery by ganciclovir in the brain without physiological alterations by a live attenuated herpes simplex virus vector"Neuroscience Research. 45. 233-241 (2003)
• [文献書誌] Phumiamorn S et al.: "Induction of cell-mediated and humoral immunity to hepatitis B surface antigen by a novel adjuvant activity of Oka varicella vaccine"Journal of General Virology. 84. 287-291 (2003)
• [文献書誌] Tsuji T et al.: "Induction of cellular immunity to varicella-zoster virus glycoproteins tested with pernasal co-administration of Escherichia coli enterotoxin in mice"Journal of Medical Virology. 69. 451-458 (2003)
• [文献書誌] Takasaki I et al.: "Effects of analgesics on delayed postherpetic pain in mice"Anesthesiology. 96. 1168-1174 (2002)
• [文献書誌] Kurokawa M et al.: "Effect of interleukin-12 level augmented by Kakkon-to, a herbal medicine, in the early stage of influenza infection on its alleviation"Antiviral Research. 56. 183-188 (2002)
• [文献書誌] Furuta Y et al.: "In vitro and in vivo activities of anti-influenza viral compound T-705"Antimicrobial Agents & Chemotherapy. 46. 977-981 (2002)
• [文献書誌] Kamiyama et al.: "Effect of immunity on gene delivery into anterior horn motor neurons by live attenuated herpes simplex virus vector."Gene Therapy. 8. 1180-1187 (2001)
• [文献書誌] Takasaki et al.: "Gabapentin antinociception in mice with acute herpetic pain induced by herpes simplex virus infection."Journal of Pharmcology and Experimental Therapeutics. 296. 270-275 (2001)
• [文献書誌] Shiraki et al.: "Construction of Oka varicella vaccine expressing human immunodeficiency virus env antigen."Journal of Medical Virology. 64. 96-103 (2001)
• [文献書誌] Yokoyama et al.: "Varicella-zoster virus gH : gL contains a structure reactive with the anti-human gamma chain of IgG near the glycosylation site."Journal of General Virology. 82. 331-334 (2001)
• [文献書誌] Kamiyama et al.: "Characterization of the DNA polymerase gene of varicella-zoster viruses resistant to acyclovir"Journal of General Virology. 82. 2761-2765 (2001)
• [文献書誌] Kurokawa et al.: "Biological characterization of eugeniin as an anti-herpes simplex virus type 1 compound in vitro and in vivo."Journal of Pharmcology and Experimental Therapeutics. 297. 372-379 (2001)