ハゼ科魚シロウオをモデルとしたアロマターゼ発現系の解析

• 研究課題/領域番号: 13660194
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 水産学一般
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 朝比奈 潔 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (10147671)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2002
• 研究課題ステータス: 完了 (2002年度)
• 配分額: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円); 2002年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2001年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
• キーワード: ハゼ科魚類 / シロウオ / 性成熟 / エストラジオール17β / アロマターゼ / A-type / B-type / 卵巣型

研究概要

シロウオLeucopsarion petersiはハゼ科の小型遡河性魚類で,ある程度卵黄蓄積が進行した状態で川に遡上するが,遡上後卵黄蓄積はいったん停止し,河川で営巣後急速に卵黄蓄積が進行し産卵に至る.営巣前の,卵黄蓄積が一旦休止したシロウオの卵巣を用い、in vitroで生殖腺刺激ホルモンを添加し培養液中に産生されたestradiol-17β(E_2)の濃度を測定した.シロザケのGTH-I(FSH)とGTH-II(LH)の効果を比較したところ,GTH-IIはin vitroでのE_2産生に高い効果を示したが,GTH-Iは弱い効果しか示さなかった.それぞれのGTHに特異的な抗体を用いた免疫染色によっても,抗GTH-II抗体では下垂体主葉後部に明瞭な陽性反応が見られたのに対し,抗GTH-I抗体では反応は認められなかった.したがって,シロウオ(おそらく他のハゼ科魚も)GTH-Iの産生量がごく少ないか産生していない可能性がある.今後,遡上前の個体やハゼ科の他魚種を用いた実験が必要であろう.
卵巣を用い,E_2産生に重要な酵素であるアロマターゼ(P450arom)cDNAの全塩基配列を決定したところ,517残基のアミノ酸をコードした全長1996塩基からなっていた.一方,脳を含む頭部からは,全長1668塩基からなり500アミノ酸残基をコードする別のタイプのP450aromのcDNAが得られた.アミノ酸の相同性の比較から,これらはそれぞれ,硬骨魚類で知られているA-typeとB-typeのP450aromであることが明らかとなった.現在,それぞれの遺伝子を動物細胞で発現させ,おのおのの酵素の生化学的特性と生理学的な役割を明らかにしようとしている.

研究成果

• [文献書誌] 波多野 順: "営巣前のシロウオLeucopsarion peersi卵巣卵における外部生殖腺刺激ホルモン投与によるin vitroでのエストラジオール-17β産生"日本水産学会誌. 67. 475-480 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] J.Hatano: "Perspective in comparative endocrinology : Unity and Diversity (分担執筆)"H.J.Th.Goos, R.K.Rastogi, H.Vaudry, R.Pierantoni eds., Monduzzi Editore, Itary. 1291 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 朝比奈 潔: "新ホルモンハンドブック(分担執筆)"日本比較内分泌学会編,南山堂(印刷中). (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] J. Hatano, K. Asahina, N. Akiyama, and T. Kobashi: "In vitro effects of gonadotropins on estradiol-17β production in the ovaries of ice goby Leucopsarion peterci before nesting"Nippon Suisan Gakkaishi. 67(3). 475-780 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] J. Hatano, K. Asahina, G. Yoshizaki, A. O. Sudrajat, and K. Aida (H. J. Th. Goos, R. K. Rastogi, H. Vaudry, R. Pierantoni eds.): "Cloning and sequence analysis of cDNA encoding P-450 aromatase from the ovaries of ice goby, and mRNA expression of P-450 aromatase during oocyte development, Perspective in comparative endocrinology : Unity and Diversity"Monduzzi Editore. 1109-1114 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] 波多野 順: "入巣前のシロウオLeucopsarion petersi卵巣卵における外部生殖腺刺激ホルモン投与によるin vitroでのエストラジオール-17β産生"日本水産学会誌. 67. 475-480 (2001)
• [文献書誌] Hatano, J.: "Perspective in comparative endocrinology : Unity and diversity"Monduzzi Editore, Italy (Goos, Rastogi, Vaudry, and Pierantoni eds.). 1291 (2001)
• [文献書誌] 朝比奈 潔: "新ホルモンハンドブック(日本比較内分泌学会編,分担執筆)"南山堂(印刷中). (2003)
• [文献書誌] 波多野 順: "入巣前のシロウオLeucopsarion petersi卵巣卵における外部生殖腺刺激ホルモン投与によるin vitroでのエストラジオール-17β産生"日本水産学会誌. 67. 475-480 (2001)
• [文献書誌] Hatano, J.: "Perspective in comparative endocrinology : Unity and diversity"Monduzzi Editore, Italy (Goos, Rastogi, Vaudry, and Pierantoni eds.). 1291 (2001)