| 研究課題/領域番号 |
13670079
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
薬理学一般
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
布木 和夫 東北大学, 大学院・医学研究科, 講師 (10172743)
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| 研究分担者 |
阿部 高明 東北大学, 医学部附属病院, 講師 (80292209)
石井 邦明 山形大学, 医学部, 助教授 (10184459)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2002年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2001年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | K^+チャネル / リン酸化 / PKC / アンカリングプロテイン / Xenopus oocyte / K^+チャンネル |
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| 研究概要 |
本研究では電位依存性K^+チャネルのPKC調節に心筋の電位依存性L型Ca^<2+>チャネルのPKAによる選択的機能調節を担うAKAP(A-kinase anchoring Protein)と同様のメカニズムが関与するかについて検討を行った。電位依存性K^+チャネルKv1.4およびKv4.3をXenopus卵母細胞にエンドセリン受容体ET_Aと共発現させ、エンドセリン-1で受容体刺激するとKv1.4およびKv4.3の一過性外向きK^+電流は減少した。ET_Aは一般にG_<q/11>と結合し細胞内DAG/IP_3を活性化することから、PKC阻害薬存在下に受容体刺激を行ってPKCの関与を調べた。PKC阻害薬によってKV1.4、Kv4.3K^+電流の抑制は減少し、PKCリン酸化によるKv1.4、Kv4.3チャネル修飾が示唆された。PKCリン酸化可能部位に変異をもつミュータントを作製してKvl4、Kv4.3でエンドセリン修飾に関わるPKCリン酸化部位を同定した。また細胞内Ca^<2+>増加によるCaMKII活性化の関与についてミュータントを用い検討し、Kv1.4ではエンドセリンの抑制にCaMKIIによるリン酸化が関与することが示唆された。PKC anchoring protein(RACKs)と結合するPKCのアミノ末端に相当する甲列をもつ合成ペプチドをXenopus卵母細胞にマイクロインジェクションし、エンドセリンによるKv1.4、Kv4.3チャネル修飾へのRACKsの関与を検討した。合成ペプチド存在下でもET_A刺激によるK^+電流抑制に殆ど変化はみられなかった。この結果がXenopus卵母細胞のシグナル伝達機構の性質によるのか、ET_A受容体によるKvチャネル修飾にRACKsの関与がないことをしめすのかについてはさらに検討が必要である。
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