| 研究課題/領域番号 |
13670219
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
実験病理学
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| 研究機関 | 愛媛大学 |
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研究代表者 |
加納 誠 愛媛大学, 医学部, 講師 (10116923)
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| 研究分担者 |
角田 恒輔 愛媛大学, 医学部, 助手 (20281454)
浅野 喜博 愛媛大学, 医学部, 教授 (70114353)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2002年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2001年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | マクロファージ / Th1細胞 / リステリア菌 / IgE産生 / リステリア感染 / マウスマクロファージ / Th1ダイプサイトカイン応答 / cDNAサブトラクト / cDNA-RDA法 / シグナルシークエンストラップ / Th1誘導因子 |
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| 研究概要 |
OVA特異的TCRトランスジェニックマウスDO11.10を用いて、リステリア感染を受けたマウスからのマクロファージが、CD4+Th応答にどのような役割を果たしているかを検討してきた。その結果、リステリア生菌を感染させたマウス脾臓からのマクロファージの抗原提示ではTh2タイプのサイトカイン応答が抑制され、IFN-γの産生が強められることをみいだしている。この現象は抗原非特異的に起こり、リステリア感染を受けた個体の免疫系は無関係の抗原刺激に対してもTh1タイプのサイトカイン応答を起こさせることを示している。そこで、マクロファージのどのような因子が関わっているかを調べるため、リステリア感染マクロファージに表現されるmRNAについてcDNA-RDA法を用いて、微妙な変化を増幅およびサブトラクトして解析を試みた。マクロファージ分泌蛋白ライブラリーをスクリーニングして、COS細胞にトランスフェクションし、Th1細胞を誘導する因子をアッセイ系に加えて、IFN-γの産生を指標に調べたが、どのクローンも有意なIFN-γの増強は認められなかった。そこで、細胞側因子の解析と並行してリステリア菌の責任遺伝子の解析を始めた。パスツール研究所から供与されたトランスポゾンを導入したリステリア変異株をin vitroでマクロファージに感染させ、変異によってIFN-γの産生の増強を起こすことが出来なくなったリステリア菌をスクリーニングしている。一方、Th2サイトカイン応答を抑制するリステリア菌の遺伝子はTh1を増強させるものとは別の遺伝子であることがリステリア変異株のスクリーニング結果より判明しており、これらの2つのクローンを得ることでマクロファージ側因子の解析にも新たな進展が期待される。
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