| 研究課題/領域番号 |
13670535
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
消化器内科学
|
|---|
| 研究機関 | 札幌医科大学 |
|---|
研究代表者 |
高橋 稔 札幌医科大学, 医学部, 講師 (60291556)
|
|---|
| 研究分担者 |
濱田 洋文 札幌医科大学, 医学部, 教授 (00189614)
照井 健 札幌医科大学, 医学部, 助手 (50281233)
加藤 淳二 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (20244345)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2002年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2001年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
|
|---|
| キーワード | 新規変異p53遺伝子 / 進行消化器癌 / 遺伝子治療 / アデノウイルスベクター / 進行消火器癌 / アデノウイスルベクター |
|---|
| 研究概要 |
p53のSer376をAlaに変異させ同部位のリン酸化を受けない新規の変異型p53遺伝子p53/S376Aあるいは野生型p53(wtp53)をα-fetoprotein enhancer/promoter(AFPep)あるいはcarcinoembrionic antigen promoter(CEAp)により腫瘍特異的に発現するアデノウイルスベクター(AdV)、ならびに非特異的プロモーターCMVpによりp53/S376Aあるいはwtp53を発現するAdV(AdCMVp/p53/S376A、AdCMV/wtp53)を作製した。まずAdCMVp/p53/S376Aを用いてp53欠損細胞Hep3Bにp53/S376A導入後,蛍光標識抗体染色とWestern blotで経時的にp53の局在について検討した。その結果、Hep3BにAdCMVp/p53/S376Aを感染後6時間でp53の明らかな核への局在を認め、wtp53にくらべ早期に核移行が促進していることを確認した。次に、AdCMVp/p53/S376A感染によるHep3B細胞のin vitroにおける増殖抑制効果は、AdCMV/wtp53を用いた場合に比較し有意に増強していた。つぎにHep3B細胞を皮下移植した担癌モデルマウスを用いてp53/S376Aおよびwtp53の抗腫瘍効果について検討した。AdCMVp/p53/S376A投与群ではAdCMV/wtp53に比べ有意な抗腫瘍効果と生存率の延長を認めた。この様にp53/S376A遺伝子を用いることにより、腫瘍特異的プロモーターを用いたp53遺伝子治療の問題点であったプロモーター活性の低さを克服する可能性が示唆された。今後、腫瘍特異的プロモーター制御下p53/S376A発現AdVによる消化器癌に対する検討を行う予定である。
|
