| 研究概要 |
局所脳虚血モデル動物におけるアポトーシス関連蛋白の発現解析
ラットの局所脳虚血-再灌流モデルにおいて,アポトーシスとの関与が報告されているglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)が虚血性神経細胞死に先行して過剰発現し,細胞質から核へ移行することでアポトーシスが誘導されることを証明し,J Cerebral Blood Flow and Metabolism誌に発表掲載された.GFPトランスジェニックマウスの骨髄を移植したマウスを作製し,脳梗塞における骨髄由来ミクログリア・マクロファージの関与を直接的に証明し,Neurosciense誌に発表掲載予定である.
アデノ随伴ウイルスベクターの濃縮,精製
P3実験室にて,Calbindin D28k遺伝子のAdenoassociated virus vector (AAV)への組み込みを進めている.
モデル動物へのウイルスベクター投与および遺伝子導入とその評価
また,アポトーシスの制御に関与するApaf1遺伝子のAAVへの組み込みと濃縮,精製およびウイルスタイターの調整は完了しており,研究分担者の望月が変性疾患のモデル動物へ投与し,神経細胞死が制御されることを証明し,Proc Natl Acad Sci USA誌に発表掲載された.脳虚血モデルでは砂ネズミ海馬へsterotaxicに投与を行い,導入効率を検討中である.
酸化的ストレスの評価
酸化的ストレスマーカーである4hydroxy-2-nonenal (HNE)付加化合物,8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG)の抗体により免疫組織化学を用いた病理学的解析にて,遺伝子導入の効果の確認と虚血性神経細胞死の制御について評価を進めている.
|
