| 研究課題/領域番号 |
13670819
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
仲里 仁史 熊本大学, 医学部附属病院, 助手 (10332884)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
2002年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2001年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
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| キーワード | ポドシン / 巣状分節性糸球体硬化症 / NPHS2遺伝子 / 単状分節性糸球体硬化症 / NPHS2 / Podocin / 家族性 / ステロイド抵抗性 |
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| 研究概要 |
緒言:我国で透析に至る小児は年間約100名である。うち2割は巣状分節性糸球体硬化症(FGS)である。FGSには家族性のものがあり、遺伝的異質性が認められる。常染色体劣性遺伝の本症は、腎糸球体に存在する蛋白Podocin(NPHS2遺伝子)の異常であることが解明されている。まず、小児期発症の責任遺伝子と考えられるNPHS2について遺伝子解析を行い、さらにPodocin蛋白の正常人腎および患者腎での存在様式について検討する。
方法:家族性または若年発症で末期腎不全へ進行したFGS患者について、NPHS2遺伝子の異常の有無をみる。遺伝子解析については、患者や家族の承諾を得る。次に、Podocinのアミノ酸配列から既存の蛋白と相同性の少ない部分を選択し、2個の合成ペプチドを作成する。その合成ペプチドにてラビットを免疫し抗体を作成する。正常人腎組織でのPodocinの存在様式を蛍光抗体法等にて検討する。さらに本症患者の腎組織でのPodocinの存在様式を検討する。
結論:1)6家系のFGS患者の遺伝子解析にて、NPHS2のcoding領域に変異は認められなかった。これらの患者では、NPHS2遺伝子の調節領域の異常または家族性FGSをおこす他の遺伝子異常が考えられる。2)Podocinに対するポリクロナール抗体が得られた。これを用い、正常人腎組織でのPodocinの存在様式をみると、Podocinは糸球体に限局して染色された。synaptopodinやa5(IV)鎖との二重染色にて、Podocinの発現は上皮側に局在すると考えられた。3)FGS患者19例の免疫染色では、約7割の患者にPodocinの染色性の低下または消失がみられた。消失している7例のうち2例は腎不全へ進行しており、Podocinの染色性消失は予後不良の可能性が考えられた。
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