| 研究課題/領域番号 |
13671198
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
代謝学
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| 研究機関 | 和歌山県立医科大学 |
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研究代表者 |
三家 登喜夫 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20187305)
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| 研究分担者 |
古田 眞智 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (00347585)
角田 圭子 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (80233063)
中峯 寛和 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (70155810)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
4,000千円 (直接経費: 4,000千円)
2002年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2001年度: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
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| キーワード | 2型糖尿病 / アミロイド / アミリン / IAPP / β-細胞 |
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| 研究概要 |
アミリンは膵β細胞でインスリンとともに発現し血中に分泌されている生理活性様ペプチドであるが、2型糖尿病の組織学的な特徴である膵ラ島のアミロイド沈着の主要構成成分(原因物質)であることより、糖尿病の成因との関連性が注目されている。本研究代表者らは、ヒトアミリン遺伝子変異(S20G)を発見している。本変異は日本人2型糖尿病患者の2〜3%を占めると考えられており、その発症機序の解明が待たれている。本研究において、(1)合成した異常アミリン(Gly20-amylin)は正常アミリンに比し、in vitroにおけるアミロイド生成能は亢進していた。なお、電顕にてそれぞれのアミリンにより生成されたアミロイド細線維を比較したが、明らかな差異は認めなかった。(2)異常アミリンをCOS1細胞に発現させ、アポトーシスの程度をAnnexin-Vを用いるFACS Apoptosis assay法にて定量した結果、正常アミリンに比し有意に細胞障害性が亢進していた。以上より、異常アミリンは正常アミリンに比し、アミロイド原性が亢進しており、それによるより強い細胞障害性を有することが考えられ、2型糖尿病患者のβ細胞障害に関与している可能性が考えられた。そこで異常アミリンのin vivoにおける催糖尿病作用を検討する目的で、ヒト正常(WT)および異常(M)アミリンを発現するノックインマウスの作成を試みた。WTとMそれぞれのノックインconstractを有するES細胞クローンを得、得られたES細胞をブラストシストに挿入しキメラマウスを得た。今後、これらの中より性原基にES細胞由来の遺伝子を有するキメラマウスを選別することにより、ヒト正常アミリンまたは異常アミリン(S20-amylin)にみを発現する2種類のノックインマウスが得られるが、これらを使用することにより、アミリン遺伝子異常S20Gの際糖尿病作用が解明できると考える。
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