| 研究課題/領域番号 |
13671413
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
胸部外科学
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| 研究機関 | 大阪医科大学 |
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研究代表者 |
堀本 仁士 大阪医科大学, 医学部, 助手 (70247849)
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| 研究分担者 |
大川 博永 大阪医科大学, 医学部, 専攻医
長谷川 滋人 大阪医科大学, 医学部, 講師 (00247850)
佐々木 進次郎 大阪医科大学, 医学部, 教授 (10084881)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
2002年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2001年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | 血管新生 / 骨髄細胞 / NO / 虚血耐性 / 虚血心 / HGF / NO(一酸化窒素) |
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| 研究概要 |
経動脈的ラット同種骨髄細胞移植による血管新生効果の検討
1)SDラットの片側大腿動脈を抜去し、下肢虚血モデルを作成した。
2)2週間後に同種ラット骨髄単核球を虚血部位の筋肉内に注入し、血管造影、サーモグラム、病理組織学的検索にて、虚血部位における血管新生を確認した。
3)2週間後に同種ラット骨髄単核球を虚血部位付近の動脈に注入し、血管造影、サーモグラム、病理組織学的検索にて、虚血部位における血管新生を確認した。
4)骨髄細胞移植では経動脈的投与にても筋肉内投与法と同等の血管新生効果があることが判明した。
ラット虚血心に対する骨髄細胞移植
1)SDラットを全身麻酔、気管内挿管下に左冠動脈を結紮。2週間放置し、心筋梗塞後不全心を作成した。
2)別のSDラットより骨髄細胞を採取し、比重遠心分離法にて単核球のみを抽出。1)で作成した不全心を摘出し、骨髄単核球を大動脈基部より冠動脈内に注入した。
3)骨髄単核球を注入した不全心をさらに別のラットの腹腔内に異所性心移植を行った。
4)移植後、2週間後に移植心を摘出。ランゲンドルフ灌流装置に装着し、虚血再灌流を加え、心機能および心筋梗塞範囲を測定することにより虚血耐性を評価した。虚血耐性にはsham移植群と比して、有意差はなかったが、組織学的に抗CD31抗体陽性細胞の増加を認め、血管新生効果を確認した。
eNOS遺伝子導入による骨髄細胞移植の効果の検討
1)SDラットを全身麻酔、気管内挿管下に左冠動脈を結紮。2週間放置し、心筋梗塞後不全心を作成した。
2)別のSDラットより骨髄細胞を採取し、1)で作成した不全心を摘出し、単核球を大動脈基部より冠動脈内に注入した。その際、同時にeNOS cDNAアデノウイルスをベクターとして冠動脈内に注入した。
3)移植後、2週間後に移植心を摘出。ランゲンドルフ灌流装置に装着し、虚血再灌流を加え、心機能および心筋梗塞範囲を測定することにより虚血耐性を評価した。同時に病理組織学的に血管新生効果を検討した。結果、ランゲンドルフ灌流中の冠灌流量は優位に増加し、免疫組織学的にeNOSの発現を確認した。
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