| 研究課題/領域番号 |
13671468
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
脳神経外科学
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| 研究機関 | 帝京大学 |
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研究代表者 |
金光 秀晃 (2002) 帝京大学, 医学部, 講師 (10129992)
北條 俊太郎 (2001) 帝京大学, 医学部, 助教授 (70133072)
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| 研究分担者 |
石井 映幸 帝京大学, 医学部, 助手 (40317681)
成田 考而 帝京大学, 医学部, 助手 (90237602)
中込 忠好 帝京大学, 医学部, 教授 (90198052)
金光 秀晃 帝京大学, 医学部, 講師 (10129992)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2002年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2001年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | ラット / MCA閉塞モデル / 糸モデル / total RNA / northern blot / ストレス蛋白 / in site hybridization / immunohistochemistry / in situ hybridization / 砂ネズミ / MCA永久閉塞モデル / 総頚動脈閉塞モデル |
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| 研究概要 |
(1)現在、局所脳虚血モデルとして使われている代表的なモデルとして、中大脳閉塞モデルがある。中大脳閉塞モデルとしては電気双極子による動脈を凝固し、鋏による血管を切断する永久閉塞モデル(田村モデル)と異論があるが4-0ナイロン糸の先端を丸めて外頚動脈から挿入し、中大脳動脈を閉塞する糸モデルの二種類がある。両モデルの違いを明らかにするために、ストレス蛋白hsp70を用いて、虚血後4時間、1、4日後、尾状核被殻、海馬と視床、黒質と視床下部を含むそれぞれの切片で、in situ hybridizationによりmRNAの発現とimmunohistochemistryによりHSP70の蛋白の発現を比較した。田村モデルでは、中大脳動脈灌流領域である皮質、尾状核被殻でhsp70mRNAとHSP70蛋白の発現が確認された、一方、糸モデルでは、中大脳動脈灌流領域である皮質、尾状核被殻の他に海馬、視床、黒質、視床下部でもhsp70mRNAとHSP70蛋白の発現が確認された。このことから、糸モデルは中大脳動脈閉塞モデルとしてではなく、内頚動脈閉塞モデルであることを論文(Journal Cerebral Blood Flow & Metabolism 2002;22:1196-1204)で提唱した。
(2)この両モデルを用いた、虚血後1、2,4週間、3、6,12ヶ月後の長期にわたるnorthern blotによる遺伝子発現は、将来のことを考慮し、放射線同位原子による方法ではなく、天然産物であるジゴシキゲニン(DIG)ラベルのoligonucleotideを使用する方法を行ったがpositive controlが発現が確認できないので、現在、DIG-11-UTPを用い、PCRによるDIG-ラベルしたRNAを合成し、northern blotを行う方法の至適条件を確認中である。
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