ヒト軟骨肉腫におけるNFATp発現の意義および遺伝子治療への応用

• 研究課題/領域番号: 13671506
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 整形外科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 上田 孝文 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00324773)
• 研究分担者: 中瀬 尚長 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00283755) ; 名井 陽 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (10263261) ; 吉川 秀樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60191558)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2003年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2002年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2001年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
• キーワード: 軟骨肉腫 / 遺伝子治療 / NFATp / 組織特異的プロモーター / 11型コラーゲン / チミジンキナーゼ / II型コラーゲン

研究概要

最近,リンパ球系におけるT細胞レセプターを介したシグナル伝達系の重要な転写調節因子であるNFAT (Nuclear factor of activated T cells) familyのうちのNFATpがadultマウスにおける軟骨形成阻害因子であることがノックアウトマウスを用いた実験で証明され,さらにヒト間葉系幹細胞の軟骨への分化・増殖の際にも抑制因子として作用していることが明らかにされたことから,ヒト軟骨肉腫細胞においてもNFATp遺伝子の異常がその発症・進展に関与している可能性が推測される。そこでまず我々はヒト軟骨肉腫におけるNFATp遺伝子発現の有無を調べる目的で,我々の施設で凍結保存してあるヒト軟骨肉腫10例の腫瘍組織について,NFATpの各エクソン配列を増幅するPCRプライマーを作成しRT-PCR法により,その発現の有無をスクリーニングした所,10例全例でNFATpの遺伝子発現が認められた。さらに京都大学整形外科の青山らもヒト軟骨肉腫26例についてNFATpの遺伝子変異を検索し,4ヶ所7例において塩基置換を認めたもののいずれもsilent mutationあるいは多型性変異と考えられ,本遺伝子の軟骨肉腫における関与は明らかでなかったと報告していることから,ヒト軟骨肉腫においてNFATpは遺伝子治療の標的分子としては適当ではないと判断した。そこで我々は,教室の妻木らがすでにクローニングした軟骨細胞に特異的に発現する11型コラーゲンα2遺伝子(Col11α2)のプロモーター領域とHerpes Simplex Virus Tymidine Kinase(HSV-TK)を挿入したプラスミドベクターを作成し,これをヒト軟骨肉腫細胞株にトランスフェクトして安定発現細胞株を作成した。今後これらを用いて,さらにin vitro, in vivoでの遺伝子治療実験を行っていく予定である。

研究成果

• [文献書誌] Ueda, T., et al.: "Frequent expression of smooth muscle markers in malignant fibrous histiocytoma of bone."J Clin Pathol. 55. 853-858 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ueda, T., Oji, Y., Naka, N., et al.: "Overexpression of the Wilms' tumor gene WT1 in human bone and soft-tissue sarcomas."Cancer Science. 94(3). 271-276 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ogose, A., Yazawa, Y., Ueda, T., et al.: "Alveolar soft part sarcoma in Japan : Multi-institutional study of 57 patients from the Japanese Musculoskeletal Oncology Group."Oncology. 65(1). 7-13 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Miyaji, T., Nakase, T., Ueda, T., et al.: "Monoclonal antibody to parathyroid hormone-related protein induces differentiation and apoptosis of chondrosarcoma cells."Cancer Letters. 199(2). 147-155 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishii, T., Ueda, T., Myoui, A., et al.: "Unusual skeletal metastases from myxoid liposarcoma only detectable by MR imaging."European Radiology. 13. 185-191 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nakanishi, H., Araki, N., Ueda, T., et al.: "Cystic synovial sarcomas : Imaging features with clinical and histopathologic correlation."Skeletal Radiology. 32(12). 701-707 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ueda, T., Araki, N., Mano, M., Myoui, A., Joyama, S., Ishiguro, S., Yamamura, H., Takahashi, K, Kudawara, I, Yoshikawa, H.: "Frequent expression of smooth muscle markers in malignant fibrous histiocytoma of bone."J Clin Pathol. 55. 853-858 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ueda, T., Oji, Y, Naka, N, Nakano, Y, Takahashi, E., Koga, S., Asada, M., Dceba, A., Nakatsuka, S., Abeno, S., Hosen, N., Tomita, Y, Aozasa, IC, Tamai, N., Myoui, A., Yoshikawa, H., Sugiyama, H.: "Overexpression of the Wilms' tumor gene WT1 in human bone and soft-tissue sarcomas."Cancer Sci. 94(3). 271-276 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ogose, A., Yazawa, Y, Ueda, T., Hotta, T., Kawashima, H., Hatano, H., Morita, T.: "Alveolar soft part sarcoma in Japan: Multi-institutional study of 57 patients from the Japanese Musculoskeletal Oncology Group."Oncology. 65. 7-13 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Miyaji, T., Nakase, T., Onuma, E., Sato, K, Myoui, A., Tomita, T., Joyama, S., Ariga, K., Hashimoto, J., Ueda, T., Yoshikawa, H.: "Monoclonal antibody to parathyroid hormone-related protein induces differentiation and apoptosis of chondrosarcoma cells."Cancer Lett. 199(2). 147-155 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishii, T., Ueda, T., Myoui, A., Tamai, R, Hosono, R, Yoshikawa, H.: "Unusual skeletal metastases from myxoid liposarcoma only detectable by MR imaging."Eur Radiol. 13. 185-191 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nakanishi, H., Araki, N., Sawai, Y, Kudawara, L, Mano, M, Ishiguro, S., Ueda, T., Yoshikawa, H.: "Cystic synovial sarcomas: Imaging features with clinical and histopathologic correlation."Skeletal Radiol. 32(12). 701-707 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ueda, T., Oji, Y., Naka, N., et al.: "Overexpression of the Wilms' tumor gene WT1 in human bone and soft-tissue sarcomas"Cancer Science. 94(3). 271-276 (2003)
• [文献書誌] Ogose, A., Yazawa, Y., Ueda, T., et al.: "Alveolar soft part sarcoma in Japan : Multi-institutional study of 57 patients from the Japanese Musculoskeletal Oncology Group"Oncology. 65(1). 7-13 (2003)
• [文献書誌] Miyaji, T., Nakase, T., Ueda, T., et al.: "Monoclonal antibody to parathyroid hormone-related protein induces differentiation and apoptosis of chondrosarcoma cells"Cancer Letters. 199(2). 147-155 (2003)
• [文献書誌] Ishii, T., Ueda, T., Myoui, A., et al.: "Unusual skeletal metastases from myxoid liposarcoma only detectable by MR imaging"European Radiology. 13. 185-191 (2003)
• [文献書誌] Nakanishi, H., Araki, N., Ueda T., et al.: "Cystic synovial sarcomas : Imaging features with clinical and histopathologic correlation"Skeletal Radiology. 32(12). 701-707 (2003)
• [文献書誌] Naka, N., et al.: "Expression of SSX genes in human osteosarcomas"Int J Cancer. 98. 640-642 (2002)
• [文献書誌] Nakanishi, H., et al.: "Clinical implications of serum C-reactive protein levels in malignant fibrous histiocytoma"Int J Cancer. 99. 167-170 (2002)
• [文献書誌] Obata, H., et al.: "Analysis of organ selectivity in the metastatic behavior of Dunn osteosarcoma"Clin Orthop. 398. 212-222 (2002)
• [文献書誌] Ueda, T., et al.: "Frequent expression of smooth muscle markers in malignant fibrous histiocytoma of bone"J Clin Pathol. 55. 853-858 (2002)
• [文献書誌] Yamamoto, T., et al.: "Inhibition of murine osteosarcoma cell proliferation by glucocorticoid"Anticancer Res. 22. 4151-4156 (2002)
• [文献書誌] Ladanyi M: "The der(17)t(X;17)(p11;q25)of human alveolar soft part sarcoma fuses the TFE3 transcription factor gene to ASPL, a novel gene at 17q25"Oncogene. 20(1). 48-57 (2001)
• [文献書誌] Ikushima K: "Lipoma arborescens of the knee as a possible cause of osteoarthrosis"Orthopedics. 24(6). 603-605 (2001)
• [文献書誌] Kudawara I: "Malignant hemangiopericytoma of the breast"J Comput Assist Tomogr. 25(2). 319-321 (2001)
• [文献書誌] Kudawara I: "Intramuscular haemangioma adjacent to the bone surface with periosteal reaction : Report of three cases and review of the literature"J Bone Joint Surg. 83(B). 659-662 (2001)
• [文献書誌] Kudawara I: "In vivo inhibition of tumour growth by dexamethasone in murine osteosarcomas"Eur J Cancer. 37. 1703-1708 (2001)
• [文献書誌] Nakanishi K: "Postradiation sarcomas of the pelvis after treatment for uterine cervical cancer : Review of the CT and MR findings of five cases"Skel Radiol. 30. 132-137 (2001)