| 研究課題/領域番号 |
13671682
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
泌尿器科学
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| 研究機関 | 福岡大学 |
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研究代表者 |
辻 祐治 福岡大学, 医学部, 助教授 (10188534)
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| 研究分担者 |
辻 恵美子 福岡大学, 医学部, 講師 (10248495)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2002年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2001年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | 腎細胞癌 / 分子生物学 / 低分子量G蛋白 / 細胞骨格形成 / salt-tolerant protein(STP) / 低分子量G蛋白質 / Rhoファミリー / Cdc42 / 腎癌 |
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| 研究概要 |
我々は酵母の塩分耐性因子HAL-1に機能的相補性のある遺伝子をラット腎よりクローニングし、Salt-tolerant protein(STP)として報告してきた。STPは、腎臓において近位尿細管に局在し、シグナル伝達に関与する蛋白質である可能性が高い。さらに最近、低分子量G蛋白Rhoファミリーの一員であるCdc42と相互作用を持つ蛋白として報告されたCIP4がSTPと同一蛋白であることが判明した。Rho蛋白は、アクチン細胞骨格の再編成を介して細胞の形態変化や運動、接着など多彩Fな細胞機能を制御し、癌細胞の悪性化、浸潤・転移に関与していることが明らかになりつつある。
(1)腎癌患者におけるSTP変異体の検索
当科外来及び入院腎癌患者よりEDTA採血後genomic DNAを抽出し、目的とする部分をPCRにて増幅しシークエンスにて変異体を検索した。予備実験の段階でヒト腎癌患者でSH3領域より上流に停止コドンをもつ変異体を見い出しているが、現在のところ同様の変異は見つかっていない。
(2)トランスジェニックマウスの作製
ホモ接合体の同定には至らず、過剰発現において致死的に作用する可能性もある。
(3)STP野生体、変異体黄色蛍光タンパク質発現系の確立
我々が分離同定したSTPの野生体、変異体遺伝子を、黄色蛍光タンパク質発現ベクターpEYFP-C1にクローニングし、COS-1細胞に発現する系を確立した。野生体では細胞質に、変異体では核近傍に発現を認めるが、現在、変異体の細胞内局在を検討中である。
(4)STP及びCdc42発現とアクチン等細胞骨格形成蛋白発現について
上記の遺伝子を発現した細胞において、アクチン、Cdc42タンパクの発現の変化について検討した。これらの結果については、現在、論文投稿中である。
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