| 研究課題/領域番号 |
13671718
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
佐々木 順造 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (30093686)
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| 研究分担者 |
小阪 淳 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (40243216)
山田 輝夫 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (00033225)
野村 貴子 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (20116437)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
2002年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2001年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
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| キーワード | 内分泌かく乱物質 / フタル酸エステル / 活性酸素 / DNAアレイ / アポトーシス / ラット / 精巣 / In situハイブリダイゼーション / DNDアレイ / 内分泌撹乱物質 / cDNAマイクロアレイ |
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| 研究概要 |
過酸化水素などの活性酸素分子種は、精子の生理において重要な役割を持つことが知られている。プラスチックの可塑剤であるフタル酸エステルDi(2-ethylhexyl)phthalate(DEHP)による精巣萎縮の過程もビタミンCやEの投与で軽減されることから、活性酸素の関与が考えられる。
今回、35日齢のウィスター系ラットにDEHPを2g/kg経口投与することにより内分泌攪乱物質の精巣に及ぼす影響を活性酸素代謝の観点から検討した。投与直後から24時間後までの精巣の組織の変化を光学顕微鏡、電子顕微鏡を用いて検索した結果、投与6-9時間後に精細管に変性した精母細胞や多核の精子細胞が多数観察され、免疫組織学的には、TUNEL陽性細胞が精細管中に検出され、生殖細胞のアポトーシスが誘起されることが示唆された。この際、精巣のO_2^-やH_2O_2などの産生が増加する事、精巣の主要な抗酸化物であるグルタチオンやアスコルビン酸などの濃度が低下すること、精巣から分離したミトコンドリアを用いた実験により、DEHPの代謝産物であるモノエステル(MEHP)がチトクロームCを著明に遊離させることが判明した。DNAアレイ解析により、DEHP投与は、精巣における数種の遺伝子の発現を著明に減少させたが、RT-PCRやIn situハイブリダイゼーション解析では遺伝子発現の減少は顕著ではなかった。
これらの結果はDEHP投与により引き起こされた酸化ストレスが、精子形成細胞のアポトーシスを引き起こし,精巣萎縮の原因となることを示していた。
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