| 研究課題/領域番号 |
13671817
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
眼科学
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| 研究機関 | 秋田大学 |
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研究代表者 |
櫻木 章三 秋田大学, 医学部, 教授 (80006767)
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| 研究分担者 |
昆野 清輝 秋田大学, 医学部, 助手 (00312710)
山木 邦比古 秋田大学, 医学部, 助教授 (20125751)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2002年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2001年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | VKH disease / Tyrosinase family proteins / T cell / T cell clone / animal model / Dendritic Cell / Tyrosinase related protein 1 / Animal model / Tyrosinase TRP1 / T cell clonl / 前房水 / auto reactive T cell |
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| 研究概要 |
1.私達はルイス及びpigmented ratにtyrosinase family proteinの注射によって実験的自己免疫疾患を惹起することができた。このモデルの組織像は殆どヒトのVogt-小柳-原田(VKH)病と同一であった。
2.私達はVKH病患者の末梢血を用いリンパ球増殖反応を行った。新鮮未治療患者リンパ球は一つあるいは複数のtyrosinase family protein由来のpeptideに対して増殖反応を示した。これらの事実から私達はVKH病の標的抗原の一つはtyrosinase family proteinであると提唱している。
3.次にVKH病患者末梢血リンパ球からT cell cloneを樹立し、これらのtyrosinase family proteinに対する反応性、表面抗原などの解析を行った。その結果、これらのTCCはHLA DRB1^*0405に結合することのできるアミノ酸配列を持ったpeptideに反応することが判明した。またこれらはTh1系の細胞が多かった。
4.私達はヒト原田病の病局所である前房水、脳脊髄液かちは検体を採取し、クローン化することができた。原田病患者さんから採取した前房水あるいは脳脊髄液をHSVc488でtransfomし、合計7名からTCCを得ることができた。これまでに樹立したTCCについては特異性等をtyrosinase family proteinを抗原としたlymphocyte proliferation assay等にて検討した。Tyrosinase family proteinに特異的なクローンについてはその表面マーカーを同定するとともにサイトカインの産生能についても測定した。これらの詳細については実績報告書に記された通りである。これに加え、TCRを分析し、病局所に浸潤し、病変を惹起すると考えられるT cellの構成について検討中である。この検討はT cellを末梢血から採取したものと前房水から採取したものを比較することによって行う。具体的にはTCRの可変領域をRT-PCRにて増幅、SSCPにて解析する。この方法により、ラットなどのモデル動物から採取した極少量のT cellからも解析が可能となるかもしれない。
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