| 研究課題/領域番号 |
13671950
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能系基礎歯科学
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| 研究機関 | 昭和大学 |
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研究代表者 |
山田 庄司 昭和大学, 歯学部, 教授 (00111617)
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| 研究分担者 |
坂井 信裕 (坂井 信宏) 昭和大学, 歯学部, 助手 (90286849)
鈴木 恵子 昭和大学, 歯学部, 講師 (50119187)
天野 均 昭和大学, 歯学部, 講師 (90212571)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
2003年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2002年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2001年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | VEGF / CSF-1 / RANKL / 破骨細胞 / キナーゼ活性 / VEGF受容体 / Flt-1 / Fcキメラ / CSF-1^<op / op>マウス / VEGF受容体1型 / op / opマウス / 偽足 / 細胞伸展 / 可溶型受容体 |
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| 研究概要 |
(1)VEGFの破骨細胞誘導能に関する実験
Plate底面にVEGFとRANKLを含むFBSを塗布したプレート上に、調整したマウス造血幹細胞細胞を播種し6日間培養した。VEGFが支持能力は小さいものの破骨細胞を誘導することを確認した。
(2)成熟破骨細胞に対するVEGFの及ぼす影響に関する実験
マウス破骨細胞様細胞・単離破骨細胞にVEGF添加約10分後に、細胞遊走,偽足形成・伸展を認めた。
(3)2種類のVEGF受容体の破骨細胞における発現の有無に関する検索
破骨細胞の前駆細胞および破骨細胞様細胞のVEGF受容体の発現の有無を確認した。細胞内ドメインを持つ膜型とこれを持たずシグナルを伝えない可溶型の両方を持っており、可溶型受容体の方が膜型に比べて強く発現していた
(4)各種のVEGFantagonist, CSF-1 antagonistが破骨細胞誘導系に及ぼす影響に関する実験
VEGFによる破骨細胞形成誘導は、細胞内ドメインを持たないデコイレセプターとなるFlt-1/Fcキメラでは完全には阻害できなかったが、anti-VEGF抗体により破骨細胞誘導は完全に阻害された。
(5)CSF-1^<op/op>マウス及びFlt-1 kinase domain koマウス(TK-/-)の造血系細胞を使ったin vitro実験
CSF-1^<op/op>マウスおよびTK-/-マウスの造血幹細胞は、VEGFとRANKLを加えると破骨細胞が誘導された。一部は、造血支持能があるCSF-1^<op/op>マウス由来細胞株OP9細胞株との共存培養実験では、CSF-1^<op/op>マウス由来の造血幹細胞でも、TK-/-マウスを用いた場合には認められた。このことから、VEGFによる破骨細胞誘導はVEGF2型受容体の関与も示唆された。
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