| 研究課題/領域番号 |
13672176
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
矯正・小児・社会系歯学
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| 研究機関 | 神奈川歯科大学 |
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研究代表者 |
笹栗 健一 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (10235286)
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| 研究分担者 |
下野 正基 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (00085771)
石川 達也 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (30085708)
佐藤 貞雄 神奈川歯科大学, 歯学部, 教授 (00084799)
松坂 賢一 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (70266568)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2002年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2001年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
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| キーワード | ヒト骨芽細胞 / cbfa-1 / 骨芽細胞 / cbfa 1 / レーザー照射 / Cbfa1 |
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| 研究概要 |
本研究は、レーザー照射の骨芽細胞に及ぼす影響を検討する目的で、ヒト骨芽細胞であるNHOst細胞(Bio Whittaker社)を選択し検討を加えてきた。なぜなら、本研究を遂行する上でその結果は日常臨床に常にフィードバックする事を目的に検討されなければならないからである。しかしながら、本細胞は2〜3回の継代により脱分化様の細胞形態を呈し、また、細胞増殖の指標であるDNA量や骨芽細胞の分化の指標であるアルカリフォスファターゼ活性が一定化せず、その後の実験を再現性ある細胞状態を確保しつつ行なえないことが判明した。そこで、これ以降ヒト骨肉種様細胞であるMG63細胞を用いることとなった。本細胞は、NHOst細胞に比べよく研究が進んでおり、活性型ビタミンD3の添加により効率よく骨芽細胞様細胞に分化させることが報告され、本申請者等もアルカリフォスファターゼ活性の上昇とOsteocalcin遺伝子発現をPCR法にて確認している。今後この細胞を用いて引き続き検討していくつもりである。
一方、本研究を遂行していく上で作成した骨芽細胞の分化に必須の転写調節因子cbfa1およびcbfβのモノクロナール抗体の解析は進みつつある。現在cbfβのモノクロナール抗体の検討を進めており、これまで、リコンビナント蛋白を用いたWestern blot分析およびGel shift assayでのsuper shift assayでは良好な結果を得ることが出来ている。今後、ヒト由来の硬組織を用いた免疫染色を行いその特異性を検討していく予定である。
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