| 研究課題/領域番号 |
13680684
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
構造生物化学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
赤沼 宏史 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 教授 (30012462)
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| 研究分担者 |
柳澤 修一 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 助手 (20222359)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2002年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2001年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
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| キーワード | トランス-スプラシング / スプラシング / 転写因子 / Sp1 / トランス・スプライシング / スプライシング / トランス・スプライシンズ |
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| 研究概要 |
我々は、同種のpre-mRNA間におけるトランス-スプライシングにより、多様なヒト転写因子Sp1のmRNAが生み出されているということをヒト培養細胞内を用いて示してきた。同種のpre-mRNA間のトランス-スプライシングが、最近、ほ乳類において相次いで発見されてきているがこのようなトランス-スプライシングの分子メカニズムは今だまったく不明である。そこで、本研究は、このトランス-スプライシングの分子メカニズムを明らかにすることを目的として行われた。また、このようなトランス-スプライシングの生物学的意義についても検討することを目的とした。まず、Sp1におけるトランス-スプライシングがさまざまの臓器の中でも起こっていることをラットを用いて確認した。一方で、転写とスプライシングは共役しているので、大きなイントロンが存在すると本来のacceptor部位が合成される前に、donor部位は別のPre-mRNAのイントロン中のacceptor部位とスプラシングを起こしているのではないかという仮説、すなわち、大きなイントロンが同種間のトランス-スプライシングを引き起こす大きな要因であるという仮説を立て検証した。Sp1においてトランス-スプライシングを引き起こしていると見られる大きなイントロン(イントロン3)を縮めたSp1遺伝子などを用いてヒト培養細胞を形質転換し、その形質転換体でのトランスースプライシングを調べた結果、配列ではなく長さそのものがトランス-スプライシングを引き起こしている要素であることが確認された。一方で、トランス-スプライシングとシスースプラシングの割合を調べたところ、トランス-スプライシングのは割合は1%であった。これらのことから、ほ乳類のスプライシング機構は本質的に副反応として同種間のトランス-スプライシングを引き起こす活性があり、大きなイントロンが存在するとその副産物のレベルが高く、検出されてきている可能性も考えられた。
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