| 研究課題/領域番号 |
13680755
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
分子生物学
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
菅原 稔 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (20311558)
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| 研究分担者 |
高野 洋志 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (00241555)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
2002年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2001年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
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| キーワード | ゲノム / 老化 / 癌 / 染色体 / 遺伝子 |
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| 研究概要 |
RecQタイプのウェルナーヘリケース遺伝子ファミリーは、ヒトとマウスにおいては少なくとも5種類以上のメンバーから成り、そのうちの3種類はヒトの劣性遺伝子疾患(ウェルナー:、ブルーム、ロスモンド・トムソン症候群)の原因遺伝子(WRN,、BLM,、RTS)であることが知られている。しかしこれらの疾患が示す老化や発癌に関連する臨床像を十分に説明し得る作用機構は未だほとんど不明であり、そこでWrn、RecQ1、RecQ4,RecQ5の4種類のKO-Miceを作製し、高等生物の生体内における各ヘリケースの機能・役割分担の解析を試みている。以下これまでに得られた知見を要約する。
Q1 KO-Miceはほぼメンデル則に従って得られ、これまでのところ特に外見上の異常は観察されない。変異アレル由来のLacZレポーター遺伝子の発現をもとに生体内での発現を解析した結果、精巣の精母細胞や卵巣の卵母細胞といった生殖細胞で高発現であり、また脳の海馬や小脳のプルキンエ細胞層といった細胞増殖を伴わない神経系細胞での発現も観察された。
Wrn KO-Miceは、1年以上の長期にわたる経過観察や病理組織学的解析では、老化徴候の著変や腫瘍発生の増加は観察されず、成長及び生存日数にも顕著な差は認められなかったマウス胎仔線維芽細胞(MEF)を用いて細胞増殖活性を調べたところ(Wrn-/-)MEFの増殖活性は野生型の約60%の増殖であった。また、Wrn KO-MiceとQ1 KO-Miceとの二重変異マウスは、これまでほぼメンテル則に従って得られることが判明した。
RecQ4ヌルタイプのKO-Miceは着床前後の胎生3.5〜6.5日に致死であることが判明した。胎生3.5日に採取した(Q4-/-)胚盤胞を培養して解析した結果、内部細胞塊や栄養胚葉細胞の増殖が著しく低下しているのが観察され、Q4遺伝子産物は初期発生に重要な機能を持つことが明らかとなった。このRecQ4ヌルタイプのKO-Miceが胎生致死であることは、Genetic backgroundをC57BL/6からBalb/cマウスへ変えた場合でも同様であった。
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