| 研究課題/領域番号 |
13680771
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
分子生物学
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| 研究機関 | 愛知県がんセンター |
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研究代表者 |
広瀬 富美子 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 主任研究員 (60208882)
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| 研究分担者 |
山口 政光 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (00182460)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2002年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2001年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | クロマチンリモデリング / 転写因子 / Mi-2 / DREF / 遺伝子発現制御 / クロマチン / 転写調節因子 / ショウジョウバエ |
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| 研究概要 |
クロマチン構造を介した遺伝子発現制御におけるDREFの役割を明らかにするために、DREF全長をbaitに用いたyeast two hybrid screenを行い、これと相互作用する因子を検索したところ、クロマチンリモデリング複合体のひとつであるNuRD複合体のサブユニットとして知られるMi-2(ATP依存性ヘリカーゼ)のcDNAを得た。免疫沈降実験により、DREFとMi-2が相互作用することを証明し、GST pull down法を用いて、両者の結合領域を決定した。さらに、ショウジョウバエの遺伝学的方法を用いたいくつかの解析から、Mi-2はDREF機能を抑制的に制御していることが結論された。また、その分子機構として、Mi-2がDREFのDNA結合活性を阻害することによることを明らかにした。生化学や遺伝学を用いた解析により、両者のin vivoでの相互作用が証明できたが、ショウジョウバエ唾腺染色体におけるDREFとMi-2の局在を免疫染色法で調べると両者は相互排除的に染色体に結合していることを観察している。Mi-2はすでにDNAに結合しているDREFのDNA結合活性には影響を与えないという実験結果を考慮すると、DREFとMi-2の特異的相互作用による新規なクロマチン構造の制御機構が存在すると予想できる。また、ヒトDREFの解析も開始し、その発現が細胞の増殖とよく相関しており、細胞周期でも変動があることを見いだした。
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