| 研究課題/領域番号 |
13770146
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
ウイルス学
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| 研究機関 | 群馬大学 |
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研究代表者 |
田中 淳 群馬大学, 医学部, 教務員 (20321953)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2002年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2001年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | HTLV-1 / GFP / VSVΔG^*-G / シュードタイプウイルス / cDNAライブラリー / 細胞表面膜蛋白 / HTLV-I / VSV△G^*-G / レセプター |
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| 研究概要 |
1.HTLV-1とGFP組換え牛水胞性口内炎ウイルス(VSVΔG^*-G)との間で、高力価のシュードタイプウイルスを作製できた。
2.VSVG^*/HTLV-1シュードタイプウイルスを用いて種々の培養細胞へのHTLV-1の感染性を検討した。
3.HTLV-1高感受性ヒト培養細胞株のcDNAライブラリーを作製し、HTLV-1低感受性培養細胞株へ導入した。このcDNAライブラリ発現細胞株のうち、HTLV-1の感染性が高いものをVSVG^*/HTLV-1シュードタイプウイルスウイルスを用いてスクリーニングし、HTLV-1高感受性cDNAライブラリー発現細胞をクローニングした。
4.HTLV-1高感受性cDNAライブラリ発現細胞クローンより、導入したcDNAを回収し塩基配列を調べ、遺伝子を同定した。今回同定した遺伝子は2つあり、これらは同じ遺伝子のグループに入ることが明らかとなった。
5.HTLV-1高感受性cDNAライブラリー発現細胞クローンから回収したcDNAのORF(open reading frame)を発現プラスミドにクローニングし、HTLV-1低感受性培養細胞株へ導入したところ、導入した細胞でHTLV-1感染の感受性が亢進した。
6.今回同定した遺伝子のコードしている蛋白は細胞表面膜蛋白であり、HTLV-1レセプター遺伝子(HTLV1-R)と考えられた。またこれらの遺伝子と同じグループにはいる遺伝子の1つが同様にHTLV-1レセプター遺伝子としての機能を有していることが明かとなった。
7.種々の培養細胞でのHTLV1-Rの発現をmRNAの発現や、フローサイトメトリー等で調べ、これらの細胞でのHTLV-1の感受性とあわせて、比較検討した。
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