Kupffer細胞の固形がん細胞株に対する抗腫瘍効果の検討 Kupffer細胞による固形がん肝転移制御をめざして

• 研究課題/領域番号: 13770712
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 東京医科大学
• 研究代表者: 和田 建彦 東京医科大学, 医学部, 助手 (20307367)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2002
• 研究課題ステータス: 完了 (2002年度)
• 配分額: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円); 2002年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2001年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
• キーワード: Kupffer細胞 / 抗腫瘍効果 / Apoptosis / Fas ligand / Fas-Fas ligand system / micrometastasis

研究概要

1,ラットKupffer細胞の癌細胞株に対する抗腫瘍効果の証明
前年度(平成13年)ラットKupffer細胞がJurkat(Fas発現株),colon26(Fas発現を確認)にapoptosisを誘導するのを確認したが、癌細胞株自体の増殖能には言及していなかった。そのため、本年度、細胞DNAフラグメンテーションELISAキット(Roche)を用いて、Jurkatおよびcolon26をPO-labeled BrdUにて標識し、Kupffer細胞と混合培養し癌細胞株が培養液中に放出したPO-labeled BrdUを測定した.この放出されたPO-labeled BrdUは細胞の破壊を意味し、cytotoxicityを示す.その結果混合培養により放出されたPO-labeled BrdUの増加が認められ,Kupffer細胞のJurkatおよびcolon26に対するcytotoxicityが証明された.
2,Kupffer細胞の癌細胞株に対するApoptosis誘導及びCytotoxicityに関して
ラットKupffer細胞が癌細胞株に対するApoptosis誘導及びCytotoxicityは、E/T比が10/1の時,抗腫瘍効果を示し,1/1では逆の効果を示した.この事は肝転移を形成したものには無効だが,Kupffer細胞はmicrometastasisの制御には関与する可能性が考えられた.
3,Fas ligand遺伝子のKupffer細胞への導入
ラットkupffer細胞にFas ligand遺伝子導入を試みたが、成功しなかった.その理由としてKupffer細胞の長期培養が出来ないことにある。そこで、現在、Kupffer細胞の培養液に様々なサイトカインを混ぜKupffer細胞の長期培養をこころみている。