| 研究課題/領域番号 |
13877401
|
|---|
| 研究種目 |
萌芽研究
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
病態検査学
|
|---|
| 研究機関 | 徳島大学 |
|---|
研究代表者 |
松島 明美 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教務員 (70116862)
|
|---|
| 研究分担者 |
松本 満 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (60221595)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
|
| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2002年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2001年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
|
|---|
| キーワード | 一酸化窒素(NO) / 吸収スペクトル / 電子スピン共鳴(ESR) |
|---|
| 研究概要 |
一酸化窒素(NO)は不安定なフリーラジカルであり、生体内での挙動を正確に捕らえることが困難であったことが、NOの生理学的、あるいは病理学的役割を長いあいだ解明できなかった一因である。このようなNOの特性をふまえて、生体維持機構におけるNOの位置付けを明確にするためには、NOを正確に、しかも簡便に測定する技術の開発が必要不可欠である。私達は、吸収スペクトルの測定というきわめて簡便な方法(吸収法)によってNOの測定が可能であることを発見し、この測定技術の確立と臨床応用を目指して研究を進めている。
現在、NOの産生を直接測定するためには、PTIOを代表とするNOの選択的消去剤が利用されている。すなわち、PTIOはNOとの反応によりPTIを生成するが、産生されたPTIの量を指標としてNOの定量が行われる。しかしながら、これまでPTIの検出には電子スピン共鳴(ESR)スペクトルの測定が用いられてきたため、広く一般に実施可能な測定法であるとは言い難い。私達は、PTIOからPTIへの生成に伴い、560nmにおける吸光度の減少と、420nmにおける吸光度の上昇が起こることを発見し、この現象を利用して簡便なNO測定法の開発に取り組んでいる。昨年度は、このような420nmにおける吸光度の上昇が、実際にPTIOからPTIへの変換に基づくことを従来から用いられてきたESRスペクトルの測定との比較によって確認した。続く本年度は、細胞培養系でNOのリアルタイムな測定系の確立を試みた。すなわち、NOの選択的消去剤であるPTIOをNO産生細胞(活性化マクロファージ)の培養系に直接加えて、培養液中に産生されるNOを吸収法により、リアルタイムでモニターする系を試みた。現時点では、細胞毒性の低減が課題となり、実現には至っていないが、緩衝液の変更により克服可能と考え、培養条件の改良を試みている。
|
