新規ＨＣＶ／ＧＢＶ－Ｂキメラウイルスによる革新的Ｃ型肝炎霊長類モデルの構築

• 研究課題/領域番号: 13J01032
• 研究種目: 特別研究員奨励費
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 国内
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 鈴木 紗織 京都大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円); 2015年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2014年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2013年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
• キーワード: C型肝炎 / 新世界ザル / GBV－B / 動物モデル / ワクチン / NK細胞 / HCV / GBV-B / キメラウイルス / マーモセット / タマリン / シュードタイプウイルス / depletion

研究実績の概要

C 型肝炎のワクチン開発に必要な安全性・有効性評価や C 型肝炎の病態解析には大きな障害が存在する。その障害の一つとして適切な感染モデルがないことが挙げられる。本研究ではこのブレイクスルーを目標として、C型肝炎ウイルス（HCV）と新世界ザルに肝炎を引き起こすGBウイルスB（GBV－B）に着目し新世界ザル指向性 HCV/GBV-B キメラウイルスの構築を目指した。
昨年度に作製したGBV-B/HCVキメラウイルスがマーモセットに感染はしたものの持続感染は示さなかったことから、持続感染へのメカニズムをGBV－B感染サルを用いて解析した。すると急性感染後にウイルスが排除される場合は、NK細胞のうち細胞障害活性マーカー（CD335、CD159a）を表出しているNK細胞（CD3-CD56dimCD16+）の割合がウイルスの動態に少し遅れて平行に増減していることがわかった。一方で慢性感染を起こしたGBV－B感染タマリンの慢性期を解析すると、GBV-B非感染サルと同程度の低い割合を示していた。このことから、GBV－B感染において急性期後にクリアランスされるにはNK細胞の細胞障害活性が重要であることが示唆された。さらに液性免疫の視点から解析すると、慢性感染個体では血漿中の抗core、E2、NS3抗体価の誘導の遅延および低い抗体価が検出された。E2に関しては中和抗体のターゲットになるため、抗E2抗体に中和活性がある可能性が考えられる。
以上の結果から、持続感染にはNK細胞の細胞傷害活性と抗体誘導が重要な因子であることが示唆された。今後は、昨年度までに確立したCD8 depletionの方法を用いて、細胞傷害活性を弱めたサルにキメラウイルスを接種し、より効率よくウイルスが増殖できるモデルに改良したい。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Persistent replication of a hepatitis C virus genotype 1b-based chimeric clone carrying E1, E2 and p6 regions from GB virus B in a New World monkey. (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki S, Mori K, Higashino A, Iwasaki Y, Yasutomi Y, Maki N, Akari H
  • 雑誌名: Microbiology and Immunology. 巻: 60 号: 1 ページ: 26-34
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12349
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Increased expression of the regulatory T cell-associated marker CTLA-4 in bovine leukemia virus infection. (2015)
  • 著者名/発表者名: Suzuki S, Konnai S, Okagawa T, Ikebuchi R, Nishimori A, Kohara J, Mingala CN, Murata S, Ohashi K
  • 雑誌名: Veterinary immunology and immunopathology 巻: 163 号: 3-4 ページ: 115-124
  • DOI: 10.1016/j.vetimm.2014.10.006
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] New type of Sendai virus vector provides transgene-free iPS cells derived from chimpanzee blood. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujie Y, Fusaki N, Katayama T, Hamasaki M, Soejima Y, Soga M, Ban H, Hasegawa M, Yamashita S, Kimura S, Suzuki S, Matsuzawa T, Akari H, Era T
  • 雑誌名: PloS one 巻: 9 号: 12 ページ: 113052-113052
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0113052
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Expression analysis of Focp3 in T-cells from bovine leukemia virus infected cattle. (2013)
  • 著者名/発表者名: Suzuki S, Konnai S, Okagawa T, Ikebuchi R, Shirai T, Sunden Y, Mingala N. Claro, Onuma M, Murata S, Ohashi K
  • 雑誌名: Microbiology and Immunology. 巻: 58 号: 8 ページ: 600-604
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12073
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient in vivo depletion of CD8+ T lymphocytes in common marmosets by novel CD8 monoclonal antibody administration (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Suzuki S, Iwasaki Y, Kaneko A, Saito A, Enomoto Y, Higashino A, Watanabe A, Suzuki J, Inoue K, Kuroda T, Takada M, Ito R, Ito M, Akari H
  • 雑誌名: Immunology Letters. 巻: 154 号: 1-2 ページ: 12-17
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2013.08.005
  • 査読あり
• [学会発表] Genetic and immunological escape in persistent GBV-B infected New World monkeys/慢性GBV-B感染におけるenvelope変異および液性免疫からの逃避 (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴木紗織
  • 学会等名: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2015-11-22
• [学会発表] Genetic and immunological escape in persistent GBV-B infection (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴木紗織
  • 学会等名: 22nd International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Strasbourg (France)
  • 年月日: 2015-10-09
  • 国際学会
• [学会発表] 新世界ザルにおける液性免疫応答の機能低下は霊長類肝炎ウイルスの持続感染に寄与する (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴木紗織
  • 学会等名: 第31回日本霊長類学会大会
  • 発表場所: 京都大学百周年時計台記念館（京都府京都市）
  • 年月日: 2015-07-18
• [学会発表] HCVベースのHCV/GBV-Bキメラウイルスはタマリンへ長期感染する (2015)
  • 著者名/発表者名: ○鈴木紗織、東濃篤徳、森健一、片貝祐子、槇昇、明里宏文
  • 学会等名: 第62回日本実験動物学会 総会
  • 発表場所: 京都府京都市
  • 年月日: 2015-05-28 – 2015-05-30
• [学会発表] HCVベースのHCV/GBV-Bキメラウイルスはタマリンへ長期感染する (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴木紗織
  • 学会等名: 第62回日本実験動物学会 総会
  • 発表場所: 京都テルサ（京都府京都市）
  • 年月日: 2015-05-28
• [学会発表] GBV-B感染マーモセット/タマリンにおける慢性化移行には液性免疫応答の遅延が関与する (2014)
  • 著者名/発表者名: ○鈴木紗織、東濃篤徳、森健一、片貝祐子、齊藤暁、槇昇、明里宏文
  • 学会等名: 第61回日本実験動物学会 総会
  • 発表場所: 北海道札幌市
  • 年月日: 2014-05-15 – 2014-05-17
• [学会発表] GBV-B感染における慢性化移行には液性免疫応答の遅延が関与する (2013)
  • 著者名/発表者名: 鈴木紗織、東濃篤徳、森健一、吉田友教、片貝祐子、齊藤暁、槇昇、明里宏文
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市
  • 年月日: 2013-11-11
• [学会発表] The delayed humoral immune responses may be associated with the development of chronic GBV-B infection. (2013)
  • 著者名/発表者名: Saori Suzuki, Atsunori Higashino, Kenichi Mori, Yuko Katakai, Akatsuki Saito, Noboru Maki, Hirofumi Akari
  • 学会等名: 20th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Melbourne, Australia
  • 年月日: 2013-10-08
• [学会発表] GBV-B感染新世界ザルの液性免疫解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鈴木紗織、東濃篤徳、森健一、吉田友教、齊藤暁、槇昇、明里宏文
  • 学会等名: 第60回日本実験動物学会 総会
  • 発表場所: 茨城県つくば市
  • 年月日: 2013-05-16
• [備考] 京都大学霊長類研究所人類進化モデル研究センター 明里研
  • URL: http://akari-labo.jimdo.com
• [備考] 人類進化モデル研究センター比較免疫薇生物領域明里研究室
  • URL: http://www.pri.kyoto-u.ac.jp/sections/chemr/akari-lab/pg157.html