| 研究課題/領域番号 |
13J01127
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 研究分野 |
生物分子科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
安田 智一 大阪大学, 理学研究科, 特別研究員(DC2)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2014年度)
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| 配分額 *注記 |
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
2014年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2013年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | 脂質ラフト / スフィンゴミエリン / コレステロール / 重水素固体NMR / 蛍光寿命測定 / 蛍光異方性測定 |
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| 研究実績の概要 |
脂質ラフトは、スフィンゴミエリン (SM) およびコレステロール (Chol) を主成分とする細胞膜上のマイクロドメインである。本研究では、脂質ラフトを再現した人工膜の秩序液体相における脂質分子の動態を明らかにすることで、ラフト形成の分子基盤を解明することを目的とした。そのために、化学的手法 (有機合成) と物理的手法 (2H NMRや蛍光実験) を組み合わせて、原子・分子レベルから膜レベル、またミリ秒からナノ秒スケールに至る脂質の動態を広範に解析した。さらに、SMと一般的な脂質であるグリセロリン脂質の動態を多角的に比較した。
具体的には、蛍光寿命測定を行い、その結果を2H NMRと比較した結果、脂質分子の局所的な動態と膜全体の流動性が密接に相関していることが示された。また、均一と考えられたCholを含む2成分系膜においても、ナノ秒スケールでは2つのドメインが共存することが示唆された。これらのドメインの存在比を見積もると、SMはより多くのLoドメインを形成していることが推定された。これらは、測定原理上タイムスケールの長いNMRでは検出できないため、非常に重要な知見である。
さらに、より生体膜に近い環境でダイナミクスを解析するために、3種の重要な膜脂質であるSM、Chol、PCに着目し2H NMRを測定した。様々な3成分の組成比で測定した結果、脂質膜中で分離した2つの相における脂質の動的挙動はほぼ等しいが、分配比は組成比によって変化した。また、蛍光顕微鏡によって3成分系膜中の分離した2相の面積比を見積もった結果、SMはより多くのLoドメインを形成していることを明らかにした。
このように、ラフトモデル膜中の脂質の動態を広範に解析することで、生体膜における脂質ラフト形成時に重要な機能の分子基盤になっているSMの特異的要因を明らかにした。
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| 現在までの達成度 (段落) |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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