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生体外培養を用いた魚類卵濾胞の最終成熟分子機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 13J02197
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 水産学一般
研究機関北海道大学

研究代表者

石原 学  北海道大学, 水産科学院, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
2014年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2013年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワード排卵能 / 卵成熟能 / 卵成熟・排卵 / LH / 次世代シーケンサー / 生体外配偶子生産 / 卵濾胞培養 / 精子培養 / 採卵適期推定 / LH感受性 / 試験管ベビー
研究実績の概要

これまでに、魚類の卵濾胞は、黄体形成ホルモン(LH)により卵成熟能を獲得後、さらにLHが作用することで排卵能を獲得する事が示唆されているが、その詳細については明らかとされていない。本研究では、卵濾胞の成熟進行度の経時的変化と、特に排卵能に関してその分子機構に関する知見の集積を目的とした。
まず、チョウザメ類を対象とし、卵濾胞培養系を用いて卵濾胞の成熟進行度の変化および獲得時期を調べた。その結果、卵成熟能を有する卵母細胞、および排卵能を獲得できる能力を有する卵濾胞は7月から8月に出現し始めた。組織学的観察の結果、これらの月の卵母細胞のステージは卵黄形成完了前であることが示唆されたが、これは他魚種では全く報告の無い新知見である。また、排卵能の獲得傾向は個体ごとに異なるものの大きく4種類に分類することが可能であり、増加傾向にある個体からは良質卵が得られたことから、個体ごとの排卵誘導適期の見極めに応用できる。
次世代シーケンサーを用いて排卵能に関わる遺伝子群を探索したところ、ニホンウナギからは7個、コチョウザメからは15個の排卵能獲得関連遺伝子が選抜された。また、他魚種で既知の排卵関連遺伝子としてそれぞれ7個および5個が選抜された。これらの遺伝子のうち、特に、mmp9およびptgs2は排卵能獲得に関与する遺伝子として何らかの役割を有すると推測された。今後は発現量を指標として簡便な卵濾胞の成熟進行度の判別および排卵誘導適期の推定が可能になると考えられる。
また、チョウザメ類において精子培養による未熟な精巣内精子の運動能獲得誘導に成功した。さらに、卵濾胞培養後に排卵された生体外由来の卵、および培養精子を用いた試験管ベビーの作出にも成功している。孵化率は高い個体において90%に達し、同一個体から複数回にわたる作出が可能であることから、今後種苗生産方法の一つとしても有効である。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2014 実績報告書
  • 2013 実績報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Seasonal changes in oocyte maturational competence, ovulatory competence and gonadotropin sensitivity of ovarian follicles in hybrid sturgeon, bester (Huso huso × Acipenser ruthenus)2014

    • 著者名/発表者名
      Manabu Ishihara, Bunpei Tokui, Tomoki Abe, Shigeho Ijiri and Shinji Adachi
    • 雑誌名

      Journal of Applied Ichthyology

      巻: 30 号: 6 ページ: 1141-1148

    • DOI

      10.1111/jai.12579

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Indicators for artificial induction of ovulation in bester sturgeon (Huso huso × Acipenser ruthenus)2014

    • 著者名/発表者名
      ○Ishihara M, Tokui B, Abe T, Ijiri S and Adachi S
    • 学会等名
      食とバイオ国際交流シンポジウム 2014
    • 発表場所
      北海道函館 函館市国際水産・海洋総合研究センター
    • 年月日
      2014-06-03
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Seasonal changes in oocyte maturational competence and ovulatory competence in bester sturgeon (Huso huso × Acipenser ruthenus)2013

    • 著者名/発表者名
      Manabu Ishihara
    • 学会等名
      7^<th> International Symposium on Sturgeon
    • 発表場所
      Vancouver Island Conference Centre(カナダ)
    • 年月日
      2013-07-24
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書

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公開日: 2014-01-29   更新日: 2024-03-26  

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