| 研究課題/領域番号 |
13J02547
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 研究分野 |
分子生物学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
磯部 真也 北海道大学, 生命科学院, 特別研究員(DC2)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2014年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2014年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2013年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | DSB修復 / Homologous recombination / 53BP1 / Rif1 / ヘテロクロマチン / DNA修復 / HP1 |
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| 研究実績の概要 |
新規DNA損傷応答タンパク質SCAI/HPB66が53BP1のCDKによるリン酸化 (リン酸化S/T-P site) を認識して結合し、DNA損傷部位集積していることを示した。また、SCAI/HPB66ノックダウンによる影響を調べたところ、Homologous recombination (HR) に関わる重要なタンパク質郡のDNA損傷への集積が顕著に減退することが分かった。HRの効率をレポーターアッセイ系で評価したところ、SCAI/HPB66ノックダウンによりHRが抑制されていることが明らかとなった。2013年、53BP1のATMによるリン酸化 (リン酸化S/T-Q site) に結合するタンパク質としてRif1が同定され、HRに抑制的に働いていることが報告された。SCAIとRif1の関係を調べてみると、認識する53BP1のリン酸化サイト、制御しているリン酸化酵素が異なること、SCAIとRif1の53BP1の結合領域が同じであること、Rif1ノックダウン細胞ではSCAIと53BP1の結合が強くなることが分かった。これらの結果から、SCAIとRif1は排他的に53BP1と結合し、SCAIはRif1のHR抑制機能を更に阻害することでHRを促進していることが考えられた。実際、HR進行に重要なタンパク質の集積の減退は、SCAI, Rif1ダブルノックダウンの細胞では見られなくHR進行が回復した。
また、Rif1に結合するタンパク質として脱リン酸化酵素PP1が知られており、我々のRif1のプロテオミクスの解析からもRif1結合タンパク質としてPP1が同定された。PP1はRif1依存的にDNA損傷部位に集積すること、PP1阻害剤を添加すると、BRCA1の集積が増加することから、PP1とDNA損傷に関しても新たな展望が得られそうである。
以上の研究結果を論文にし、現在投稿中である。
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| 現在までの達成度 (段落) |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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