| 研究課題/領域番号 |
13J06703
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 研究分野 |
応用分子細胞生物学
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| 研究機関 | 東京理科大学 |
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研究代表者 |
濱崎 英史 東京理科大学, 基礎工学研究科, 特別研究員(PD)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2014年度)
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| 配分額 *注記 |
2,530千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 330千円)
2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2013年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | SOG1 / SnRK1 / リン酸化 / リン酸アフィニティー電気泳動 / sd3 / Antimycin A / ATP / BiFC / 細胞周期 |
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| 研究実績の概要 |
昨年度を含む2年間で植物の機能未知タンパク質SOG1とがん抑制因子であるp53との機能類似性の検証を行うことで植物におけるATP量の減少がトリガーとなるエンドサイクル制御機構の存在を立証するため、以下3つの研究を実施した。
① SOG1とSnRK1の遺伝学的ネットワークの解析
② SOG1とSnRK1との相互作用を調べる生化学的解析
③ SOG1のリン酸化レベルを調べる生化学的解析
昨年度中に①および②について研究を終え、今年度は③について解析を行った。動物のp53は、細胞内ATP量の減少により活性化するAMPKによってリン酸化されることが知られている。動物AMPKのキナーゼドメインと植物SnRK1のキナーゼドメインは相同性が高く、SOG1のアミノ酸配列にも複数のリン酸化サイトが存在しているため、SOG1はリン酸化修飾される標的因子の可能性が考えられた。これを調べることで、SOG1とp53との機能類似性を示すことができると考えた。SOG1が細胞内のATP量に応答して修飾されるかどうかを調べるため、ATP合成阻害剤であるAntimycin Aを処理した植物体と処理しない植物体からタンパク質を抽出してSOG1タンパク質の挙動を調べた。リン酸アフィニティー電気泳動でSOG1を検出したところ、Antimycin A処理した植物体のSOG1タンパク質を示すバンドは、一部が高分子側にシフトした。このことからSOG1タンパク質は細胞内のATP量の減少に伴ってリン酸化修飾を受けている可能性が考えられた。
以上の結果から、植物にも細胞内ATPが少なくなることでエンドサイクルを調節する機構が存在する可能性が示唆された。以上の結果は纏め上げ、学術論文としてPlant Cell誌へ投稿した。現在は、レフェリーの助言に従って追加実験を行っている。また追加実験と並行して、再投稿する準備を行っている。
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| 現在までの達成度 (段落) |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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