時期特異的ＲＮＡｉスクリーニングによる睡眠関連遺伝子の探索

• 研究課題/領域番号: 13J08393
• 研究種目: 特別研究員奨励費
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 国内
• 研究分野: 神経科学一般
• 研究機関: 公益財団法人東京都医学総合研究所 (2014-2015); 独立行政法人理化学研究所 (2013)
• 研究代表者: 上野 太郎 公益財団法人東京都医学総合研究所, 特別研究員(PD)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 採択後辞退 (2015年度)
• 配分額: 4,320千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 720千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
• キーワード: 遺伝子工学 / 睡眠 / 記憶 / 麻酔 / ショウジョウバエ / 遺伝子改変 / CRISPR/Cas9

研究実績の概要

ショウジョウバエをモデル動物として、睡眠と記憶の遺伝学的解析を進めた。研究計画当初は、RNAiスクリーニングを計画していた、CRISPR/Cas9によるゲノム改変技術を導入し、そちらを中心として遺伝子改変をショウジョウバエにおいて行っている。
CRISPR/Cas9を用いた遺伝子改変により、睡眠を制御する新規遺伝子の同定ができた。これまでは外注で作成していた、トランスジェニックラインを、研究室内で胚にDNAをインジェクションすることにより、自前で作成することができるようになっている。これにより、迅速かつ安価にトランスジェニックラインを多数の遺伝子をターゲットとして利用することができるような体制が整っている。
さらに、CRISPR/Cas9を応用することにより、ノックイン個体の作成にも成功しており、蛍光タンパク質との融合タンパクを内在性のプロモーターで発現する個体が得られている。これらの技術を発展させることで、今後、睡眠や記憶に関わる遺伝子のさらなる詳細な解析ができるものと期待される。

現在までの達成度 (段落)

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

今後の研究の推進方策

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] ショウジョウバエを用いた睡眠の基礎研究 (2015)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎、粂和彦
  • 雑誌名: 日本薬理学雑誌 巻: 145 号: 3 ページ: 134-139
  • DOI: 10.1254/fpj.145.134
  • NAID: 130004827728
  • ISSN: 0015-5691, 1347-8397
• [雑誌論文] Glial dysfunction causes age-related memory impairment in Drosophila. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki D, Horiuchi J, Ueno K, Ueno T, Saeki S, Matsuno M, Naganos S, Miyashita T, Hirano Y, Nishikawa H, Taoka M, Yamauchi Y, Isobe T, Honda Y, Kodama T, Masuda T, Saitoe M
  • 雑誌名: Neuron 巻: 84 号: 4 ページ: 753-763
  • DOI: 10.1016/j.neuron.2014.09.039
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Functional characterization of dopamine transporter in vivo using Drosophila melanogaster behavioral assays (2014)
  • 著者名/発表者名: Ueno T, Kume K
  • 雑誌名: Frontiers in Behavioral Neuroscience 巻: 8 ページ: 303-303
  • DOI: 10.3389/fnbeh.2014.00303
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Temporal organization of rest defined by actigraphy data in healthy and childhood chronic fatigue syndrome children (2013)
  • 著者名/発表者名: Minako Kawabata, Taro Ueno, Jun Tomita, Junko Kawatani, Akemi Tomoda, Shoen Kume and Kazuhiko Kume
  • 雑誌名: BMC Psychiatry 巻: 13 号: 1 ページ: 281-210
  • DOI: 10.1186/1471-244x-13-281
  • 査読あり
• [雑誌論文] Special Review : 睡眠/覚醒を制御する分子・神経基盤の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎, 粂和彦
  • 雑誌名: 細胞工学 巻: 9月号(未定)
• [学会発表] 児童・生徒の睡眠障害について (2015)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 北区学校保健総会
  • 発表場所: 滝野川会館（東京都・北区）
  • 年月日: 2015-05-14
  • 招待講演
• [学会発表] 睡眠研究の最前線 (2015)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 都医学研都民講座
  • 発表場所: 東京都医学総合研究所（東京都・世田谷区）
  • 年月日: 2015-04-24
  • 招待講演
• [学会発表] CRISPR/Cas9による行動の遺伝学的解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 日本統合失調症学会
  • 発表場所: 都市センターホテル（東京都・千代田区）
  • 年月日: 2015-03-27
  • 招待講演
• [学会発表] Sleep study using Drosophila (2014)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 日本時間生物学会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂（福岡県・博多区）
  • 年月日: 2014-11-08
  • 招待講演
• [学会発表] ドーパミントランスポーターによるショウジョウバエの行動制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 日本動物行動学会
  • 発表場所: 長崎大学文教キャンパス（長崎県・長崎市）
  • 年月日: 2014-11-02
• [学会発表] モデル動物を用いた睡眠の基礎研究 (2014)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 霧島睡眠カンファレンス
  • 発表場所: かごしま高岡病院（鹿児島県・鹿児島市）
  • 年月日: 2014-09-20
  • 招待講演
• [学会発表] 睡眠と麻酔の類似性から探る新規睡眠関連遺伝子 (2014)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 日本睡眠学会
  • 発表場所: あわぎんホール（徳島県・徳島市）
  • 年月日: 2014-07-04
  • 招待講演
• [学会発表] ショウジョウバエを用いた新規睡眠制御因子の同定 (2013)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 第38回日本睡眠学会
  • 発表場所: 秋田
  • 年月日: 2013-06-27
  • 招待講演
• [学会発表] ドーパミントランスポーターによるドーパミンシグナルの制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 上野太郎
  • 学会等名: 第36回日本神経科学学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2013-06-21