ホヤ初期胚に局在するRNA群の機能の網羅的解析

• 研究課題/領域番号: 14034226
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 徳島大学 (2003); 京都大学 (2002)
• 研究代表者: 真壁 和裕 徳島大学, 総合科学部, 助教授 (60222288)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 6,800千円 (直接経費: 6,800千円); 2003年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円); 2002年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
• キーワード: ホヤ / 母性因子 / RNA / 局在 / EST / UTR / データベース

研究概要

我々はホヤ卵内において胚の前後軸形成・不等分裂などに必須とされている植物極側後方の領域に局在するRNAを数多く単離し、その局在経路の違いからそれらがtypeIとtypeIIのふたつのグループに分類されることを明らかにした。本研究では、これらのRNAの局在を担う配列を絞り込み、その領域に結合する因子を単離することによって、ホヤの卵や胚におけるRNAの局在に関わる分子機構を明らかにするとともに、さらに卵内に局在する多数のRNAが発生過程における機能を解析するために、局在RNAに対するモリフォリノオリゴを網羅的に注入して機能欠損個体を作製し、解析することが目的である。標識した合成RNAの未受精卵への顕微注入実験から、局在にはtypeI・typeIIともに3'UTRが必要十分であることが分かった。つぎにその結果得られたそれぞれの配列に共通して見られる構造を検索すると共に、その配列に結合する因子を生化学的及び分子生物学的手法を駆使して単離し、その性状を明らかにしつつある。さらに、局在RNAが見られるCABという領域におけるRNA-タンパク質複合体の存在様式を電子顕微鏡レベルで解析して、RNAの局在機構についての知見を得た。一方、局在RNAが発生過程で担う役割を明らかにするべく、5'UTRに対するモルフォリノオリゴを網羅的に卵に顕微注入して機能欠損個体を作製し、組織分化や形態形成に果たす役割を解析している。

研究成果

• [文献書誌] Wang, C-P., Yagi, K.: "Identification of a gene encoding a typical carboxy-glutamic a domain in the tunicate Halocynthia roretzi."J.Thrombosis and Hemostasis. 1. 118-123 (2003)
• [文献書誌] Nakamura, Y.: "Localization and expression pattern of type 1 postplasmic mR in embryos of the ascidian Halocynthia roretzi."Gene Exp.Patterns. 3. 71-75 (2003)
• [文献書誌] Kauffman, J.S.: "Neural expression of the Huntington's desease gene as a chord evolutionary novelty"J.Exp.Zool.(Mol.Dev.Evol.). 297B. 57-64 (2003)
• [文献書誌] Shepherdley, C.A.: "An ascidian homolog of vertebrate iodothyronine deiodinases"Endocrinology. 145. 1255-1268 (2004)
• [文献書誌] Kawashima, T.: "Update of MAGEST : MAboya Gene Expression patterns and Sequence Tags"Nuc. Acids Res.. 30. 119-120 (2002)
• [文献書誌] Yagi, K.: "Retinoic acid differently affects the formation of palps and surrounding neurons in the ascidian tadpole"Dev. Genes Evol.. 212. 288-292 (2002)
• [文献書誌] Yagi, K.: "Neural marker genes differently expressed in subsets of embryonic neural cells of the ascidian Halocynthia roretzi"Zool. Sci.. 19. 885-889 (2002)
• [文献書誌] Sasakura, Y.: "Identification of the cis elements which direct the localization of maternal mRNAs to the posterior pole of ascidian embryos"Dev. Biol.. 250. 128-144 (2002)
• [文献書誌] Dehal, P.: "The sequence of the ascidian Ciona intestinalis genome : insights into the evolutionary origins of chordates and vertebrates"Science. 298. 2157-2167 (2002)
• [文献書誌] Nakamura, Y.: "Localization and expression pattern of type 1 postplasmic mRNAs in embryos of the ascidian Halocynthia roretzi"Mech. Dev.. (In press). (2003)