内分泌攪乱物質による免疫応答の攪乱撹乱作用

• 研究課題/領域番号: 14042256
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 理工系
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 林 秀敏 名古屋市立大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (80198853)
• 研究分担者: 瀧井 猛将 名古屋市立大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (80244573) ; 小野嵜 菊夫 名古屋市立大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (20101313)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円); 2003年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円); 2002年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: 内分泌攪乱物質 / サイトカイン / 関節リウマチ / インターロイキン1 / エストロゲン受容体 / Sp1 / HIV / 転写 / estradiol / estrogen receptor / Interleukin 1 / HIV-1 / promoter / synoviocyte / arylhydrocarbon receptor / endocrine disrupters

研究概要

1.滑膜細胞からの炎症性サイトカインの産生に及ぼす内分泌攪乱物質の影響
関節リウマチ患者由来滑膜細胞株MH7Aからの炎症性サイトカインの産生がエストラジオール(E2)や内分泌撹乱物質によってどのような影響を受けるか、IL-1αのプロモーター活性をレポーターアッセイで検討したところ、estrogen receptor(ER)α依存的な活性化がE2の濃度依存的に認められ、さらに、-52〜-42bpの領域がE2によるIL-1αのプロモーター活性化に重要であることがわかった。この領域にはGC rich領域が存在し、この領域を含むオリゴヌクレオチドをプローブとしてEMSAを行ったところ、無刺激の状態で転写因子Sp1の結合が検出され、E2刺激によりその結合が増強した。この領域へのERαの結合は観察されなかったが、E2の刺激の有無にかかわらず、ERαとSp1は結合しており、Sp1の転写活性はE2によって亢進することがわかった。以上の効果はそのプロモーター領域内にGC rich領域を持つTNFαやTGFβ1などでも見られ、また、同様の結果はエストロゲン活性を有するdiethylstilbestrol(DES)やBisphenol A等でも濃度依存的に観察された。
2.ウイルスの複製に及ぼす内分泌攪乱物質の影響
HIV-1の複製に対する内分泌攪乱物質の影響を検討するために、HIV-1のLTRプロモーター活性に及ぼすE2及び3-メチルコラントレン(3-MC)の作用を調べた。すると、E2によりER alpha依存的に、3-MC処理によりAhR(Aryl hydrocarbon receptor)依存的にHIV-1 LTRプロモーター活性が亢進することが明らかとなった。このいずれの作用にもHIV-1 LTRのGC rich領域に結合するSp1が重要であることを見出した。

研究成果

• [文献書誌] H.Ohata, T.Tetsuka, H.Hayashi et al.: "3-Methylcholanthrene activates human immunodeficiency virus type 1 replication via aryl hydrocarbon receptor."Microbiology and Immunology. 47(5). 363-370 (2003)
• [文献書誌] T.Takii, S.Kawashima, T.Chiba, H.Hayashi et al.: "Multiple mechanisms involved in the inhibition of proinflammatory cytokine production from human monocytes by N-(p-coumaroyl)serotonin and its derivatives."International Immunopharmacology. 3(2). 273-277 (2003)
• [文献書誌] A.Tamaki, H.Hayashi et al.: "Polycyclic aromatic hydrocarbon increases mRNA level for interleukin 1 beta in human fibroblast-like synoviocyte line via aryl hydrocarbon receptor."Biological and Pharmaceutical Bulletin. 27(3). 407-410 (2004)
• [文献書誌] H.Ohata, T.Tetsuka, H.Hayashi et al.: "3-Methylcholanthrene activates human immunodeficiency virus type 1 replication via aryl hydrocarbon"Microbiology and Immunology. 47(5)(in press). (2003)
• [文献書誌] T.Hattori, N.Ohoka, H.Hayashi et al.: "C/EBP homologous protein upregulates IL-6 transcription by trapping negative regulating NF-IL6 isoform"FEBS Letters. (in press). (2003)
• [文献書誌] T.Takii, S.Kawashima, T.Chiba, H.Hayashi et al.: "Multiple mechanisms involved in the inhibition of proinflammatory cytokine production from human monocytes by N-(p-coumaroyl) serotonin and its derivatives"International Immunopharmacology. 3(2). 273-277 (2003)
• [文献書誌] H.Hayashi, Y.Inoue, et al.: "TGFβ down-regulates INF-γ production in IL-18 treated NK cell line LNK5E6"Biochemical and Biophysical Research Communication. 300(4). 980-985 (2003)
• [文献書誌] T.Hattori, N.Ohoka, Y.Inoue, H.Hayashi, et al.: "C/EBP family transcription factors are degraded by the proteasome but stabilized by forming dimer"Oncogene. 22(9). 1273-1280 (2003)
• [文献書誌] T.Matsumura, T.Degawa, T.Takii, H.Hayashi, et al.: "TRAF6-NF-κB pathway is essential for IL-1-induced TLR2 expression and its functional response to TLR2 ligand in murine hepatocytes"Immunology. (in press). (2003)