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動物工場を用いた魚類生殖腺刺激ホルモンの大量生産

研究課題

研究課題/領域番号 14360107
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 水産学一般
研究機関国際基督教大学

研究代表者

小林 牧人  国際基督教大学, 教養学部, 準教授 (30183809)

研究分担者 吉崎 悟朗  東京海洋大学, 海洋科学部, 助教授 (70281003)
研究期間 (年度) 2002 – 2003
研究課題ステータス 完了 (2003年度)
配分額 *注記
14,900千円 (直接経費: 14,900千円)
2003年度: 7,200千円 (直接経費: 7,200千円)
2002年度: 7,700千円 (直接経費: 7,700千円)
キーワード生殖腺刺激ホルモン / 組換えホルモン / ニジマス / カイコ / キンギョ / 組換えタンパク質
研究概要

本研究は、組換えGTHをカイコ幼虫あるいはニジマス受精卵を動物工場として遺伝子工学的に大量生産し、これらのホルモンを用いて新しい魚類の催熟技法を確立することを目的としている。脳下垂体では、2種類のGTH(濾胞刺激ホルモン、FSHと黄体形成ホルモンLH)が産生され、それぞれ2つのサブユニット(FSH:α鎖とFSHβ鎖,LH:α鎖とLHβ鎖.α鎖は両GTHに共通)から構成される。
平成15年度の成果は、以下のとおりである。
・カイコによる発現系
1.GTHの2つのサブユニット(α鎖とβ鎖)を共感染法によりカイコで発現させたものを雌雄のキンギョに投与し、FSHおよびLHともにメスにおけるエストラジオール(E)産生、雄におけるテストステロン(T)産生促進作用があることを確認した。
2.2つのサブユニットを結合した1本鎖GTHをカイコに接種して発現させた。また体内でのタンパク質の分解を抑制させると言われているCTPペプチドをC末端に付加したβ鎖およびα鎖を共感染法によりカイコで発現させた。これらのGTHを雄キンギョに投与し、1本鎖FSH、LHおよびCTP付加FSH、LH、すべて排精誘起作用をもつことを確認した。
・ニジマスによる発現系
1.ニジマス4日胚で作製したキンギョの組換えLHおよびFSHは、ともにin vitroでキンギョ卵巣のEおよびT合成を促進した。また、両GTHはキンギョ精巣に対してもT合成を促進した。
2.ニジマス4日胚で作製したヒスチジンタグを付加した組換えLHは、ニッケルカラムを用いることで約120倍にまで濃縮することが可能であり、この粗精製ホルモンはキンギョ精巣のT合成を促進した。
3.ニジマス4日胚で高レベルで発現する遺伝子をEST解析により探索した結果、熱ショックコグネイト71がもっとも発現量が高いことが明らかとなった。さらに、本遺伝子のプロモーター領域はニジマス4日胚で非常に活性が高いことを見出した。

報告書

(3件)
  • 2003 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2002 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (7件)

  • [文献書誌] Kobayashi, M.: "Production of recombinant goldfish gonadotropins by baculovirus in silkworm larvae."Fish Physiol.Biochem.. 印刷中.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Morita, T.: "Production of biologically-active recombinant goldfish gonadotropins in transgenic rainbow trout."Fish Physiol.Biochem.. 印刷中.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kobayashi, M.: "Production of recombinant goldfish gonadotropins by baculovirus in silkworm larvae."Fish Physiol.Biochem.. (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Morita, T.: "Production of biologically-active recombinant goldfish gonadotropins in transgenic rainbow trout."Fish Physiol.Biochem.. (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kobayashi et al.: "Production of recombinant goldfish gonadotropins by baculovirus in silkworm larvae."Fish Physiology and Biochemistry. (印刷中). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Morita et al.: "Production of biologically-active recombinant goldfish gonadotropins in transgents rainbow trout."Fish Physiology and Biochemistry. (印刷中). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] 小林牧人, 足立伸次: "魚類生理学の基礎(会田勝美編)"恒星社厚生閣. 258 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書

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公開日: 2002-04-01   更新日: 2016-04-21  

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