• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

原発性免疫不全症における細胞骨格調節異常の解明と遺伝子治療への応用

研究課題

研究課題/領域番号 14370239
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 小児科学
研究機関東北大学

研究代表者

峯岸 正好  東北大学, 病院, 助教授 (20211592)

研究分担者 大橋 芳之  東北大学, 病院・助手 (60250825)
研究期間 (年度) 2002 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
13,400千円 (直接経費: 13,400千円)
2004年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2003年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2002年度: 12,100千円 (直接経費: 12,100千円)
キーワードウイスコット・アルドリッチ症候群 / WAS蛋白 / beta-1インテグリン / シグナル伝達 / 細胞骨格調節 / 細胞骨格 / beta1-インテグリン
研究概要

細胞抗原レセプターとβ1インテグリンを介した2つのシグナル伝達系と細胞骨格を制御すると考えられているWiskott-Aldrich症候群(WAS)の原因遺伝子WAS蛋白(WASP)遺伝子がコードするWASPとの関連を明らかにすることにより,免疫不全症に関わる細胞骨格調節異常の分子機構を解明することを目的とした。細胞形態や細胞運動に密接に関連する接着分子β1-インテグリンの活性化には,細胞骨格(F-アクチン)の重合化が必要であると云う最近の報告に着目し,WAS患者由来Bリンパ芽球様細胞株を用いて予備的な実験を行った.すなわち正常ヒトおよびWAS患者由来株化B細胞を用い、固相化フィプロネクチン刺激によるbeta1-インテグリンシグナル伝達系の機能をアダプター分子Casのチロシンリン酸化を検出することにより解析したところ、2例のWAS患者由来株化B細胞において、Cas分子のチロシンリン酸化が減弱していることを見い出した。この結果はbeta1-インテグリンにおけるシグナル伝達においてWASP分子が関与する可能性を示唆していると思われた。次に白血病患者由来T細胞株L-KAWを用いて固相化フィプロネクチン刺激後のWASP分子のチロシンリン酸化を検討した。免疫沈降のための抗WASP抗体は筆者らが開発したマウス単クローン抗体5A5を用いた。刺激後1〜2分にかけてWASP分子のチロシンリン酸化が観察された。この結果はbeta1-インテグリンを介したシグナル伝達においてWASP分子が関与する可能性を支持していた。そこでさらにbeta1-インテグリン(CD29)抗体4B4を固相化し、L-KAW細胞を用いて同様の実験を行なったところ、刺激後2〜5分にかけてWASP分子のチロシンリン酸化が観察された。次にアクチン重合が障害されているとされるWAS細胞に擬する目的で、同じ実験系にアクチン重合を阻害するとされるサイトカラシンB(CB)を添加したところ、これらのWASP分子のチロシンリン酸化が完全に抑制されることを見い出した。このことはWASP分子のチロシンリン酸化にはアクチン重合が必要であるということを示しており、従来報告されてきたシグナル伝達系とは逆方向のシグナル伝達が存在する可能性を示唆している。同様の実験系にわいて、β1-インテグリンシグナル伝達系のアダプター分子Casのチロシンリン酸化についても検討したところ、CBを添加した系では、Casのチロシンリン酸化は認められなかった。以上の結果はWAS患者におけるT細胞の機能異常に近似した現象ではないかと考えられ、細胞骨格調節異常が免疫不全症の発症機構に関与することを示唆する貴重な実験結果であると思われた。まだ予備的な実験結果の段階ではあるが、beta1-インテグリンを介したシグナル伝達系とWASPをはじめとする細胞骨格系との連繋の可能性が示唆され、細胞骨格調節異常が免疫不全症の発症機構に関与することを解明する糸口になるものと思われた。

報告書

(4件)
  • 2004 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2003 実績報告書
  • 2002 実績報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2005 2004 2003 2002 その他

すべて 雑誌論文 (12件) 文献書誌 (3件)

  • [雑誌論文] Evaluation of Hematological Reconstitution Potential of Autologous Peripheral Blood Progenitor Cells Cryopreserved by a Simple Controlled-Rate Freezing Method2005

    • 著者名/発表者名
      Kudo Y
    • 雑誌名

      Tohoku J Exp Med 205

      ページ: 37-43

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Evaluation of hematological reconstitution potential of autologous peripheral blood progenitor cells cryopreserved by a simple controlled-rate freezing method.2005

    • 著者名/発表者名
      Kudo Y.
    • 雑誌名

      Tohoku J.Exp.Med. 205

      ページ: 37-43

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Evaluation of Hematological Reconstitution Potential of Autologous Peripheral Blood Progenitor Cells Cryopreserved by a Simple Controlled-Rate Freezing Method2005

    • 著者名/発表者名
      Kudo Y, Minegishi M, et al.
    • 雑誌名

      Tohoku J Exp Med 205

      ページ: 37-43

    • NAID

      10014090105

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Fludarabine- and cyclophosphamide-based nonmyeloablative conditioning regimen for transplantation of chronic granulomatous disease : possible correlation with prolonged pure red cell aplasia2004

    • 著者名/発表者名
      Fujiwara T
    • 雑誌名

      Int J Hematol 79

      ページ: 293-297

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Fludarabine-and cyclophosphammide-based nonmyeloablative conditioning regimen for transplantation of chronic granulomatous disease : possible correlation with prolonged pure red cell aplasia.2004

    • 著者名/発表者名
      Fujiwara T.
    • 雑誌名

      Int.J.Hematol. 79

      ページ: 293-297

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Fludarabine- and cyclophosphamide-based nonmyeloablative conditioning regimen for transplantation of chronic granulomatous disease : possible correlatio with prolonged pure red cell aplasia2004

    • 著者名/発表者名
      Fujiwara T, Minegishi M, et al.
    • 雑誌名

      Int J Hematol 79

      ページ: 293-297

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] A simple controlled-rate freezing method without a rate-controlled programmed freezer provides optimal conditions for both large-scale and small-scale cryopreservation of umbilical cord blood cells2003

    • 著者名/発表者名
      Itoh T
    • 雑誌名

      Transfusion 43

      ページ: 1303-1308

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The absolute number of peripheral blood CD34+ cells predicts a timing for apheresis and progenitor cell yield in patients with hematologic malignancies and solid tumors2003

    • 著者名/発表者名
      Kudoh Y
    • 雑誌名

      Tohoku J Exp Med 199

      ページ: 111-118

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] A simple controlled-rate freezing method without a rate-controlled programmed freezer provides optimal conditions for both large-scale and small-scale cryopreservation of umbilical cord blood cells.2003

    • 著者名/発表者名
      Itoh T.
    • 雑誌名

      Transfusion 43

      ページ: 1303-1308

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The absolute number of peripheral blood CD34+ cells predicts a timing for apheresis and progenitor cell yield in patients with hematologic malignancies and solid tumors.2003

    • 著者名/発表者名
      Kudo Y.
    • 雑誌名

      Tohoku J.Exp.Med. 199

      ページ: 111-118

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Flow cytometric determination of intracytoplasmic Wiskott-Aldrich syndrome Protein in peripheral blood lymphocyte subpopulation2002

    • 著者名/発表者名
      Kawai S
    • 雑誌名

      J Immunol Methods 260

      ページ: 195-205

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Flow cytometric determination of intracytoplasmic Wiskott-Aldrich syndrome protein in peripheral blood lymphocyte subpopulations.2002

    • 著者名/発表者名
      Kawai S.
    • 雑誌名

      J.Immunol.Methods 260

      ページ: 195-205

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tsuneo Itoh, Masayoshi Minegishi, et al.: "A simple controlled-rate freezing method without a rate-controlled programmed freezer provides optimal conditions for both large-scale and small-scale cryopreservation of umbilical cord blood cells"Transfusion. 43. 1303-1308 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Kawai S, Minegishi M, et al.: "Flow cytometric determination of intracytoplasmic Wiskott-Aldrich syndrome Protein in peripheral blood lymphocyte subpopulation"J. Immunol Methods. 260. 195-205 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Kudoh Y, Minegishi M, et al.: "The absolute number of peripheral blood CD34+ cells predicts a timing for apheresis and progenitor cell yield in patients with hematologic malignancies and solid tumors"Tohoku J. Exp. Med.. 199(in press). (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書

URL: 

公開日: 2002-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi