| 研究課題/領域番号 |
14370324
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
内分泌学
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
村田 善晴 名古屋大学, 環境医学研究所, 教授 (80174308)
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| 研究分担者 |
加納 安彦 名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (50252292)
高岸 芳子 名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (50024659)
妹尾 久雄 名古屋大学, 環境医学研究所, 教授 (40135380)
鍋島 俊隆 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70076751)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
11,700千円 (直接経費: 11,700千円)
2004年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2003年度: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2002年度: 5,900千円 (直接経費: 5,900千円)
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| キーワード | 甲状腺ホルモン / ZAKI-4 / カルシニューリン / 脳 / 免疫組織化学 / ノックアウトマウス / 相同組換え |
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| 研究概要 |
甲状腺ホルモン(T_3)が脳の発達や機能に重要な役割を演じていることは、臨床的には十分認識されているが、その分子機構の詳細は未だ明らかではない。我々が、T_3応答性遺伝子として報告したZAKI-4遺伝子は、ヒトおよび齧歯類の脳で強く発現しており、この遺伝子から産生されるZAKI-4αおよびβ蛋白は共にカルシニューリン(Cn)の活性を強く阻害する。Cnは、脳の発達・機能に重要な役割を担うことがよく知られており、T_3が、ZAKI-4遺伝子の発現調節を介して、Cnの活性を調節することにより脳の発達や機能に影響を及ぼしていることが示唆される。そこで本研究は、ZAKI-4のノックアウトマウスを作製し、その表現型を解析することにより、脳の発達・機能に及ぼすT_3作用の分子機構を明らかにすること等を目的とした。そこで、マウスZAKI-4ゲノムの構造を明らかにし、ZAKI-4ノックアウトマウス作製のためのターゲティングベクターの構築およびES細胞における相同組換えを行い、キメラマウスを得た。現在、生殖細胞への移行を確認中である。一方、ZAKI-4αおよびβ蛋白を共に認識する抗体を作製し、ZAKI-4蛋白の脳における局在を検討した。その結果、ZAKI-4蛋白は、Cnが豊富に発現している海馬、大脳皮質、小脳などのニューロンに強く発現し、神経細胞体の辺縁と樹状突起でCnと共存していることが明らかとなった。また、ZAKI-4αとβ mRNAが生体内(in vivo)でT_3によりどのような調節を受けるかを検討した結果、脳ではZAKI-4α mRNAの発現が甲状腺機能低下症で低下することが示された。一方、ZAKI-4β mRNAの発現は脳では甲状腺機能の影響は受けないものの、心臓では甲状腺機能亢進症で増加した。したがって、T_3はZAKI-4遺伝子の発現をアイソフォーム特異的、臓器特異的に調節することが示された。
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