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軟骨・非軟骨細胞におけるコラーゲン分子の発現機構及び分子ドメインの機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 14370468
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 整形外科学
研究機関大分大学 (2004)
大分大学(医学部) (2002-2003)

研究代表者

吉岡 秀克  大分大学, 医学部, 教授 (00222430)

研究分担者 住吉 秀明  大分大学, 医学部, 助手 (60343357)
調 恒明  大分大学, 医学部, 助教授 (50179058)
二宮 善文  岡山大学, 医学部, 教授 (70126241)
松尾 哲孝  大分医科大学, 医学部, 助手 (10284788)
研究期間 (年度) 2002 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
14,000千円 (直接経費: 14,000千円)
2004年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2003年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2002年度: 8,600千円 (直接経費: 8,600千円)
キーワードコラーゲン / 転写調節機構 / 軟骨 / 骨 / 細胞外マトリックス / CBF / NF-Y / V / XI型コラーゲン / XIX型コラーゲン / 転写調節 / V型コラーゲン / III型コラーゲン / 遺伝子プロモーター / マイナーコラーゲン / 遺伝子発現 / 分子ドメイン
研究概要

1.コラーゲンα1(XI)鎖、α1(V)鎖及びα3(V)鎖遺伝子の発現調節機構の解析:
1)α1(XI)鎖:プロモーター上流-199が基本プロモーター領域であり、その中で-147〜-121に結合する因子が存在する。ルシフェラーゼやゲルシフトアッセイ等を用いて、ここにはCCAAT配列を認識するCBF/NF-Yが結合し、転写を正に調節をしていることを証明した。
2)α1(V)鎖:同様にα1(V)解析を行い、最小のプロモーター活性を-250〜-80の領域に限定した。この領域内の三箇所に、Sp1、CBF/NF-Y、Sp1関連の因子が結合していることを見出した。その中でCBF/NF-Yは-134〜-106内にあるCAAAT配列を認識し正に調節していた。
3)α3(V)鎖:ヒト遺伝子のプロモーター領域をカバーするゲノムDNAをクローニングし、この遺伝子の転写調節機構について解析した。基本的な転写には-129までの領域が必要であることがわかった。この領域には4箇所にタンパクが結合していた。その中で-122〜-117にはCBF/NF-Yで結合し、正の調節をしていることを示した。また、-101〜-96、-83〜-78にはレプレッサー因子が結合している可能性が強く示唆された。
2.α3(V)鎖の組織分布及び機能:マウス胎盤組織において、羊膜や暖帯組織に発現が見られたが絨毛や脱落膜には見られなかった。胎児組織では転写産物は発生中の筋組織や腱組織或いは一部の骨形成に見られたが、タンパクは主に骨形成中の組織に見られた。N末端領域の23個のアミノ酸よりなる塩基性のペプチドには骨肉腫由来細胞株に対する細胞接着性があった。
3.α1(XIX)鎖コラーゲン遺伝子欠損マウスの解析:下部食道括約部の電顕の観察で欠損マウスでは平滑筋周囲の基底膜の肥厚がみられ、平滑筋細胞周囲のスペースが広くなり、コラーゲン線維の増加が観察された。遺伝子欠損マウスでは神経自体の障害はみられないが、細胞外マトリックスを介した神経-筋肉間の刺激伝達の経路が障害を受けていると考えられた。

報告書

(4件)
  • 2004 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2003 実績報告書
  • 2002 実績報告書
  • 研究成果

    (26件)

すべて 2004 2003 2002 その他

すべて 雑誌論文 (18件) 図書 (1件) 文献書誌 (7件)

  • [雑誌論文] Esophageal muscle physiology and morphogenesis require assembly of a collagen XIX-rich basement membrane zone.2004

    • 著者名/発表者名
      Sumiyoshi, H. et al.
    • 雑誌名

      J.Cell Biol. 166

      ページ: 591-600

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Indentification of a functional CBF-binding CCAAT-like motif in the core promoter of the mouse pro-α1(V) collagen gene (Col5a1).2004

    • 著者名/発表者名
      Sakata-Takatani, K. et al.
    • 雑誌名

      Matrix Biol. 23

      ページ: 87-99

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] P38 MAPK mediates the expression of type I collagen induced by TGF-β2 in human retinal pigment epithelial cell ARPE-19.2004

    • 著者名/発表者名
      Kimito, K. et al.
    • 雑誌名

      Invest.Ophthalmol.Vis.Sci. 45

      ページ: 2431-2437

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Type II collagen accumulation in overlying dermo-epidermal junction of pilomatricoma is mediated by bone morphogenetic protein 2 and 4.2004

    • 著者名/発表者名
      Mieno, H. et al.
    • 雑誌名

      J.Invest.Dermatol. 122

      ページ: 878-884

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The transcription factor CCAAT-binding factor CBF/NF/Y and Two repressors regulate the core promoter of the human pro α3(V) collagen gene (COL5A3).2004

    • 著者名/発表者名
      Nagato, H. et al.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 279

      ページ: 46373-46383

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Identification of a functional CCAAT-like motif in the core promoter of the mouse pro-α1(V) collagen gene(Col5a1).2004

    • 著者名/発表者名
      Sakata-Takatani K., Matsuo N., Sumiyoshi H., Tsuda T., Yoshioka H.
    • 雑誌名

      Matrix Biol. 23(2)

      ページ: 87-99

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] p38 MAPK mediates the expression of type I collagen induced by TGF-β2 in human retinal pigment epithelial cells ARPE-19. Invest.2004

    • 著者名/発表者名
      Kimoto K., Nakatsuka K., Matsuo N., Yoshioka H.
    • 雑誌名

      Ophthalmol.Vis.Sci. 45(7)

      ページ: 2431-2437

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Esophageal muscle physiology and morphogenesis require assembly of a collagen XIX-rich basement membrane zone.2004

    • 著者名/発表者名
      Sumiyoshi H., Mor N., Lee S.Y., Doty S., Henderson S., Tanaka S., Yoshioka H., Rattan S., Ramirez F.
    • 雑誌名

      J.Cell Biol. 166(4)

      ページ: 591-600

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The Transcription factor CCAAT-binding factor CBF/NF-Y and two repressors regulate the core promoter of the human pro-α3(V) collagen gene(COL5A3).2004

    • 著者名/発表者名
      Nagato H., Matsuo N., Sumiyoshi H., Sakata-Takatani K., Nasu M., Yoshioka H.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 279(45)

      ページ: 46373-46383

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Type II collagen accumulation in overlying dermo-epidermal junction of pilomatricoma is mediated by bone morphogenetic protein 2 and 4.2004

    • 著者名/発表者名
      Mieno H., Kuroda K., Shinkai H., Yoshioka H., Tajima S.
    • 雑誌名

      J.Invest.Dermatol. 122

      ページ: 878-884

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Type II collagen accumulation in overlying dermo-epidermal junction of pilomatricoma is mediated by bone morphogenetic protein 2 and 42004

    • 著者名/発表者名
      Mieno, H. et al.
    • 雑誌名

      J.Invest.Dermatol. 122(4)

      ページ: 878-884

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] P38 MAPK mediates the expression of type I collagen induced by TGF-β2 in human retinal pigment epithelial cell ARPE-19.2004

    • 著者名/発表者名
      Kinoto, K. et al.
    • 雑誌名

      Invest.Ophthalmol.Vis.Sci. 45(7)

      ページ: 2431-2437

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Identification of a functional CBF-binding CCAAT-like motif in the core promoter of the mouse pro-α1(V) collagen gene (Col5a1).2004

    • 著者名/発表者名
      Sakata-Takatani, K. et al.
    • 雑誌名

      Matrix Biol. 23(2)

      ページ: 87-99

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Esophageal muscle physiology and morphogenesis require assembly of a collagen XIX-rich basement membrane zone.2004

    • 著者名/発表者名
      Sumiyoshi, H. et al.
    • 雑誌名

      J.Cell Biol. 166(4)

      ページ: 591-600

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Transgenic mouse expressing human mutant a-galactosidase A in an endogenous enzyme deficient background : a biochemical animal model2004

    • 著者名/発表者名
      Ishii, S. et al.
    • 雑誌名

      Biochim.Biophys.Acta 1690(8)

      ページ: 250-257

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] The transcription factor CCAAT-binding factor CBF/NF-Y and Two repressors regulate the core promoter of the human pro a3(V) collagen gene (COL5A3).2004

    • 著者名/発表者名
      Nagato, H. et al.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 279(45)

      ページ: 46373-46383

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] The transcription factor CCAAT-binding factor CBF/NF-Y regulates the proximal promoter activity in the human α1(XI) collagen gene (COL11A1).2003

    • 著者名/発表者名
      Matsuo, N. et al.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 278

      ページ: 32763-32770

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The Transcription factor CCAAT-binding factor CBF/NF-Y regulates the proximal promoter activity in the humanα1(XI) collagen gene(COL11A1).2003

    • 著者名/発表者名
      Matsuo N., Wang Y.-H., Sumiyoshi H., Sakata-Takatani K., Nagata H., Sakai K., Sakurai M., Yoshioka H.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 278(35)

      ページ: 32763-32770

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [図書] 実践 骨代謝マーカー I型コラーゲンの代謝(福永仁夫編)2002

    • 著者名/発表者名
      松尾哲孝他
    • 総ページ数
      385
    • 出版者
      メデイカルレビュー社
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 松尾哲孝, 吉岡秀克: "I型コラーゲンの代謝"実践 骨代謝マーカー. 53-66 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuo N et al.: "The transcription factor CCAAT-binding factor CBF/NF-Y regulates the proximal promoter activity in the human α1(XI) collagen gene (COL11A1)"J.Biol.Chem.. 278・35. 32763-32770 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Takeo N et al.: "Structure and hetero geneity of the human gene for epiplakin(EPPK1)"J.Invest.Dermatol.. 121・5. 1224-1226 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Urabe N et al.: "Basement membrane type IV collagen molecules in the choroid plexus, mater and capillaries in the mouse brain"Arch. Histol. Cytol.. 65(2). 133-143 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Kawano R et al.: "Identification and characterization of a soluble cadherin-7 isoform produced by alternative splicing"J. Biol. Chem.. 277(49). 47679-47685 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] 吉岡秀克 他: "軟骨に発現するコラーゲン遺伝子の選択的スプライシング"Connective Tissue. 34(2). 157-163 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] 住吉秀明 他: "XIX型コラーゲンに関する最近の知見"Connective Tissue. 34(2). 175-179 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書

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公開日: 2002-04-01   更新日: 2016-04-21  

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