| 研究課題/領域番号 |
14370574
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
形成外科学
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
百束 比古 日本医科大学, 大学院医学研究科, 教授 (00165135)
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| 研究分担者 |
村上 正洋 日本医科大学, 医学部, 講師 (00239500)
中澤 南堂 日本医科大学, 医学部, 講師 (20010051)
石丸 さやか 日本医科大学, 医学部, 助手 (00297889)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
11,300千円 (直接経費: 11,300千円)
2004年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2003年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2002年度: 6,200千円 (直接経費: 6,200千円)
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| キーワード | KELOIDS / HYPERTROPHIC SCARS / DNA-MICROARRAY / REAL-TIME PCR / PROTEOGLYCANS / EXTRACELLULAR MATRIX / ケロイド培養線維芽細胞 / lumican / decorin / microarray解析 / collagen形成 / promoter領域 / ケロイド / Real-Time PCR / c-erb B / Par-1 / Mda-7 / TGF-β1 / Decorin / 肥厚性瘢痕 / 細胞増殖 / マイクロビーズ・アレイ / II-24 / PAR-1 |
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| 研究概要 |
(1)Mda-7遺伝子とそのタンパクを誘導・発現しても、ケロイド線維芽細胞の増殖抑制は見られない。
(2)Thrombinはケロイド細胞増殖促進効果を示す。
(3)ビオチン化cDNAをoligo-nucleotides結合マイクロビーズにhybridizeさせ、R-PE標識アビジンで検出する蛍光マイクロビーズアレイ法を開発した。
(4)C-erb-B2とc-erb-B4のNorthern解析では、ケロイドと正常線維芽細胞株の間に差異を認めない。
(5)正常細胞1株を対照に、ケロイド線維芽細胞2株につき約2万種プローブ"DNAマイクロアレイで解析し、20種のケロイド細胞特異発現遺伝子を見出した。
(6)Par-1の特異発現はケロイド線維芽細胞1株にのみ見られ、Mda-7には特異発現性が見られない。
(7)Par-1およびMda-7遺伝子発現のリアルタイムPCR解析では、千種プローブマイクロアレイ解析とは相反する結果を得た。
(8)ケロイド線維芽細胞1株のマイクロアレイ解析によりデコリン遺伝子発現に約50%の低下、リアルタイムPCR解析でデコリンに関連するTGF-β1遺伝子発現に約50%の低下が示された。
(9)有遺伝素因性ケロイド患者(5例)の患部組織由来線維芽細胞5株、無素因ケロイド患者由来線維芽細胞2株、他の疾患の皮膚組織由来線維芽細胞3株を新規樹立した。
(10)有遺伝素因性ケロイド細胞系と原組織につきデコリン及びルミカン遺伝子とそのタンパク発現を、リアルタイムPCR法と免疫組織化学的染色法で調べたが、ケロイドと正常組織・細胞の間に差異を認めない。
(11)有遺伝素因性ケロイド線維芽細胞5株それぞれにつき、正常線維芽細胞3株混合を対照に、同時に2万種プローブマイクロアレイ解析し、5株のケロイド線維芽細胞に共通・特異的発現の遺伝子を47種同定した。その中12種はup-regulated gene、35種はdom-regulated geneである。
(12)コラーゲン形成に関与する遺伝子群につき、そのプロモータ領域の塩基配列特異性を検索中である。
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